Fluoresceīna izotiocianāts CAS 27072-45-3

Fluoresceīna izotiocianātsOrange Sarkana, izotiocianāta fluorescējoša dzeltena, izotiocianāta fluorescējoša sarkana, izotiocianāta fluoresceīna izomērs I, 5- izotiocianāta fluoresceīns. Dzeltens pulveris. Tas ir higroskopisks. Tas var saistīties ar dažādiem antivielu olbaltumvielām, un antiviela pēc saistīšanas nezaudē saistīšanās specifiku ar noteiktu antigēnu. Tam joprojām ir spēcīga zaļā fluorescence sārmainā šķīdumā. Pēc skābes pievienošanas tas izgulsnējas, un fluorescence pazūd. Tas nedaudz šķīst acetonā, ēterī un naftas ēterī. Tas ir bioķīmisks reaģents, kā arī medicīniskas diagnostikas zāles, kas var ātri diagnosticēt baktēriju, vīrusu, parazītu utt. Slimības, kā arī tas var saistīties ar dažādiem antivielu olbaltumvielām, un antiviela pēc saistīšanas nezaudē saistīšanas specifiskumu ar noteiktu antigēnu, un joprojām ir spēcīga zaļā fluorescence smailīna šķīdumā. Pēc skābes pievienošanas tas izgulsnējas, un fluorescence pazūd, un tā nedaudz šķīst acetonā, ēterī un naftas ēterī.

Pētījums par īpašībāmFluoresceīna izotiocianātsmarķēts insulīns aminētam želatīnam un tā piemērošana deguna gļotādas ievadīšanā:

Neviena ārēja emulgatora stāvoklī amulācijas mikrosfēras, kas tika sagatavotas, tika sagatavotas amulikācijas, želejas, dehidratācijas un krusteniskās saites procesos, tika sagatavoti amulācijas, želejas, dehidratācijas un krusteniskās saites procesos, tika sagatavoti jauna veida pozitīvi uzlādētas želejas mikrosfēras, kas ir jauna veida pozitīvi lādētas želejas mikrosfēras. Mikrosfēru vidējais daļiņu izmērs ir 40-50 μ m. Izmērs ir vienmērīgi sadalīts. Žāvētas mikrosfēras var absorbēt apmēram 20 reizes no sava ūdens svara, veidojot hidrogēlus. Aminoizētu želatīna mikrosfērām ir lielāks aminoskats nekā želatīna mikrosfērām. Tos pozitīvi uzlādē destilētā ūdenī un fosfāta buferšķīdumā, un ZATA potenciāls destilētā ūdenī ir 41,5 mV.

Palielinoties glutaraldehīda koncentrācijai vai šķērssavienojuma reakcijas laika pagarināšanai, mikrosfēru aminosmaksu saturs samazinājās. Tomēr neatkarīgi no šķērssavienojuma reakcijas apstākļiem, ar šo metodi sagatavotajiem gelatīna mikrosfērām ir augstāks primārais aminoskats nekā želatīna mikrosfērām. Aminoskābes želatīna mikrosfēras var ātri pasliktināt (<1h) in the presence of trypsin, but slowly (>20h) pepsīna un skābes bāzes barotnē. Mijiedarbība starp aminētajām želatīna mikrosfērām un mucīnu ir spēcīgāka nekā starp želatīna mikrosfērām. Augsts aminēto želatīna mikrosfēru pozitīvā lādiņa blīvums ir galvenais iemesls tās spēcīgajai mijiedarbībai ar mucīnu. Aminēto želatīna mikrosfēru bioadhezīvās īpašības tika pētītas ar fluorescences marķēšanas metodi un in vitro enzīmu sadalīšanās tehnoloģiju, izmantojot izolēto žurku kuņģa perfūzijas mazgāšanas modeli un in vivo eksperimentu žurkām.

Rezultāti parādīja, ka tādos pašos eksperimentālajos apstākļos aminēto želatīna mikrosfēru skaits, kas saglabāti izolētajā žurku kuņģī, bija vairāk nekā želatīna mikrosfēras, un apūdeņošanas šķīduma veids (mākslīgā kuņģa sula vai ph7 cilvēka fosfāta buferšķīdums) nebija būtiskas ietekmes uz kuņģa mikroshēmu, kas norādīja uz elektrostatisko mijiedarbību, un tas nav bijis elektriskais mijiedarbība, un tas nav paredzēts, ka elektrostatiskajai mijiedarbībai bija elektriskā mijiedarbība, kas nav redzama, ka nav bāzes, un tas nav paredzēts elektrostatiskai mijiedarbībai, un tas nav redzams, ka elektrostatiskais mijiedarbība bija elektrostatiska mijiedarbība, kas nav bāzes, un tas nav redzams, ka elektrostatiskais mijiedarbība ir elektrostatiska, kas nav redzams, ka tas nav bāzes, un tas nav paredzēts, ka elektrostatiskais mijiedarbība bija elektrostatiska mijiedarbība, kas nav redzama, ka nav bāzes. Izšķirošais faktors mikrosfēru kuņģa aizturēšanai šajā modelī. Tomēr eksperimentā tika atklāts, ka izolētajā žurku kuņģī saglabāto aminēto žurku kuņģī saglabāto aminēto želatīna mikrosfēru daudzumu samazinājās, sagatavojot mikrosfēras, kas norāda, ka kuņģa gļotādas, kas ietekmē ģipša, kas ietekmē ģipša, kas ietekmē ziktuļu, var ietekmēt zikli, ko var ietekmēt zibspuldzes. šķērssavienojums.

Eksperimentālie rezultāti in vivo žurkām parādīja, ka aminoskaula želatīna mikrosfērām bija labāka gļotādas adhēzija nekā želatīna mikrosfērām. Veselīgām žurkām tika pētīta aminētā želatīna ietekme uz glikāna un insulīna absorbciju deguna absorbcijā. Rezultāti parādīja, ka 0. 2% (WN) aminogelatīns varētu ievērojami veicināt fluoresceīna izotiocianat glikāna absorbciju no žurku deguna gļotādas ar biopieejamību 23,8%. Pēc 10 IU insulīna fosfāta buferšķīduma intranazāla ievadīšanas, kas satur 0 2% (masas/tilpuma) aminogenatīnu, glikozes līmenis asinīs bija ievērojami zemāks nekā insulīna fosfāta buferšķīdumā.

Fluoresceīna izotiocianāts(FITC) kā klasisks dienasgaismas marķēšanas reaģents ir kļuvis par neaizstājamu instrumentu bioloģijas, medicīnas un materiālu zinātnes jomā, ņemot vērā tā augsto kvantu ražu, lielisko fotostabilitāti un labu bioloģisko savietojamību.

Biomolekulārie marķieri: precīza izsekošana no olbaltumvielām līdz nukleīnskābēm

 

FITC izotiocianātu grupa (- n=c=s) var iziet kovalentās reakcijas ar aktīvām grupām, piemēram, amino un tiola grupām biomolekulās, veidojot stabilus dienasgaismas marķēšanas kompleksus. Šī īpašība padara to par vēlamo olbaltumvielu, nukleīnskābes un peptīdu marķēšanas reaģentu.
Olbaltumvielu marķēšana un funkcionālie pētījumi
FITC sasniedz īpašu marķēšanu, saistoties ar olbaltumvielu lizīna atlikumiem, piemēram, antivielām un lektīniem. Piemēram, imūnfluorescences eksperimentos FITC marķētās antivielas var saistīties ar šūnu virsmas antigēniem un kvantitatīvi analizēt antigēna ekspresijas līmeni caur fluorescences mikroskopiju vai plūsmas citometriju. Eksperimentālie dati rāda, ka FITC IgG konjugāta fluorescences intensitāte ir lineāri saistīta ar antigēna koncentrāciju, un noteikšanas jutība var sasniegt Danaka līmeni. Turklāt FITC marķētus olbaltumvielas var izmantot arī olbaltumvielu mijiedarbības pētījumos, piemēram, olbaltumvielu konformācijas izmaiņu analīzē, izmantojot fluorescences rezonanses enerģijas pārneses (FRET) tehnoloģiju.

 

Nukleīnskābes marķēšana un molekulārā hibridizācija
FITC var ķīmiski modificēt, lai marķētu nukleīnskābju 5 'vai 3' galu fluorescences in situ hibridizācijas (zivju) tehnoloģijai. Vēža izpētē FITC marķētās zondes var īpaši saistīties ar hromosomu patoloģiskiem reģioniem, lai palīdzētu diagnosticēt hematoloģiskās slimības, piemēram, leikēmiju un limfomu. Piemēram, FITC zondes, kas mērķētas uz BCR-ABL saplūšanas gēniem, var parādīt dzeltenus fluorescējošus signālus starpfāzu šūnu kodolos ar precizitātes ātrumu virs 95%.
Peptīdu marķēšana un zāļu piegāde
FITC marķētajiem peptīdiem ir liela nozīme zāļu piegādes sistēmās. Izmantojot M2PEP-FITC kā piemēru, šī molekula sastāv no mērķtiecīga peptīda M2PEP un FITC fluorescējošās grupas, kas var īpaši atpazīt audzēja šūnu virsmas receptorus un sasniegt mērķtiecīgu zāļu piegādi. Eksperimenti parādīja, ka M2PEP-FITC marķēto liposomu uzkrāšanās audzēja audos ir 3,2 reizes lielāka nekā brīvu zāļu, ievērojami uzlabojot terapeitisko efektivitāti un samazinot blakusparādības.

Medicīniskā diagnoze: no patogēna noteikšanas līdz audzēju agrīnai skrīningam

 

FITC fluorescences īpašības padara to par "zelta standartu" in vitro diagnostikas jomā, ko plaši izmanto tādās metodēs kā imūnhromatogrāfija, plūsmas citometrija un ELISA.
Ātra patogēnu noteikšana
FITC marķētās antivielas var izmantot baktēriju, vīrusu un parazītu infekciju ātrai diagnozei. Piemēram, malārijas diagnozē FITC marķētās antialārijas antivielas saistās ar pacienta asins uztriepi, un parazīta zaļās fluorescences signāls tiek novērots, izmantojot fluorescences mikroskopiju. Noteikšanas laiks tiek saīsināts no 2 stundām tradicionālajās metodēs līdz 15 minūtēm, un jutība sasniedz 98%. Turklāt FITC marķētās nukleīnskābju zondes var izmantot arī, lai noteiktu elpceļu vīrusa nukleīnskābes, piemēram, SARS-Cov -2 ORF1AB gēnu ar specifiskumu 99,2%.

 

Audzēja marķieri
Plūsmas citometrijā,fuorescein izotiocianātsMarķētas anti-CD45 antivielas var atšķirt leikēmijas šūnas no normālām asins šūnām. Dati rāda, ka pozitīvais FITC marķētās CD34 antivielas ātrums akūtas mieloīdā leikēmijas (AML) diagnostikā ir 85%, kas ir par 20% augstāks nekā tradicionālā morfoloģiskā izmeklēšana. Audzēju agrīnās skrīninga ziņā FITC marķētās cirkulējošās audzēju šūnu (CTC) noteikšanas tehnoloģija var uztvert audzēja šūnas īpaši zemā koncentrācijā perifēro asinīs, nodrošinot jaunu metodi cietu audzēju, piemēram, krūts vēža un plaušu vēža, agrīnai diagnozei.
Autoimūnu slimību diagnoze
ELISA tehnoloģijā FITC marķētas ar autoantivielām (piemēram, anti kodola antivielām un pret divkāršām DNS antivielām) var izmantot tādu slimību diagnozei kā sistēmiska lupus eritematosus (SLE). Eksperimenti parādīja, ka FITC-ELISA jutība ir 92% un specifiskums 95% anti-SM antivielu noteikšanai, kas ir ievērojami labāks nekā tradicionālās imūnfluorescences metodes.

Šūnu bioloģijas izpēte: no subcelulārās struktūras līdz dinamiskai izsekošanai

 

FITC šūnu caurlaidība un zemā toksicitāte padara to par ideālu instrumentu šūnu attēlveidošanai, ko plaši izmanto organellu lokalizācijā, šūnu dalīšanas novērošanā un apoptozes pētījumos.
Šūnu organelle marķēšana un dinamiska novērošana
FITC marķētās mitohondriju zondes (piemēram, Mitotracker Green) var īpaši saistīties ar mitohondriju membrānas potenciālu un uzraudzīt mitohondriju morfoloģiskās izmaiņas reālā laikā. Neironu pētījumos FITC marķētās mikrotubulu olbaltumvielu antivielas var parādīt aksonu augšanas konusu dinamisko pagarinājumu, atklājot neironu attīstības mehānismu. Turklāt FITC marķētās lizosomu zondes (Lysotracker Green) var izmantot arī autofagijas procesu izpētei, kvantitatīvi nosakot autofagosomu skaitu, mainot fluorescences intensitāti.

 

Šūnu cikla un apoptozes analīze
Plūsmas citometrijā FITC marķēts propidija jodīds (PI) var saistīties ar DNS un atšķirt dažādus šūnu cikla posmus (g 0/g1, s, g2/m) ar fluorescences intensitāti. Eksperimentālie dati rāda, ka FITC-PI dubultās krāsošanas metodes jutība šūnu apoptozes noteikšanai ir 98%, kas ir par 30% augstāks nekā tradicionālā tradicionālā zilā krāsošanas metode. Turklāt FITC marķētās aneksīna V zondes var īpaši saistīties ar fosfatidilserīnu, kas pakļauti apoptotisko šūnu virsmai, precīzi identificējot agrīnās apoptotiskās šūnas.
Šūnu migrācijas un iebrukuma pētījumi
Transvela eksperimentos FITC marķētās šūnas var uzraudzīt migrācijas procesu reālā laikā. Piemēram, audzēja metastāžu pētījumā FITC marķēto krūts vēža šūnu (MCF -7) migrācijas ātrums caur matricas līmi ir pozitīvi korelēts ar invāzijas spēju, nodrošinot kvantitatīvus rādītājus pret audzēju narkotiku skrīningam.

Zāļu izstrāde: no mērķa validācijas līdz efektivitātes novērtēšanai

 

FITC spēlē vairākas lomas zāļu izstrādē, ieskaitot mērķa validāciju, zāļu ievadīšanas sistēmas novērtēšanu un farmakokinētiskos pētījumus.
Mērķa validācija un darbības pētījumu mehānisms
Narkotiku mērķu apstiprināšanai var izmantot FITC marķētus mazu molekulu inhibitorus. Piemēram, FITC marķētie EGFR inhibitori (piemēram, gefitinibs) var parādīt zāļu saistīšanos ar EGFR receptoriem uz audzēja šūnu virsmas, kvantitatīvi nosakot saistīšanās afinitāti (KD vērtību) caur fluorescences intensitāti. Turklāt FITC marķētu siRNS var izmantot arī gēnu klusēšanas efektivitātes izpētei, nodrošinot RNS traucējumu terapijas pamatu.

Narkotiku piegādes sistēmas novērtēšana
FITC marķētās nanodaļiņas (piemēram, liposomas un polimēru mikrosfēras) var uzraudzīt zāļu izplatību un izdalīšanos in vivo reālā laikā.

 

Eksperimenti parādīja, ka FITC marķēto PEGilēto liposomu uzkrāšanās audzēja audos ir 2,8 reizes lielāka nekā brīvu zāļu, un fluorescences signāls var ilgt 24 stundas, nodrošinot vizuālus datus zāļu piegādes sistēmu optimizēšanai.

Farmakokinētiskie un toksikoloģiskie pētījumi
FITC marķētās zāļu molekulas var kvantitatīvi analizēt to absorbcijas, izplatības, metabolisma un izdalīšanās (ADME) procesus in vivo, izmantojot fluorescences attēlveidošanas tehnoloģiju. Piemēram, FITC marķēto antibiotiku (piemēram, vankomicīna) fluorescences intensitāte nierēs ir lineāri saistīta ar zāļu koncentrāciju, nodrošinot pamatu zāļu devas optimizēšanai. Turklāt FITC marķētie citotoksicitātes testi var arī novērtēt zāļu bojājumus normālām šūnām un vadīt drošības novērtējumu.

Materiālu zinātne: no sensoriem līdz dienasgaismas zondes

 

FITC fluorescences reakcijas īpašības padara to unikāli piemērojamu materiālu zinātnes jomā, ieskaitot pH sensoru, temperatūras sensoru un metāla jonu zondes attīstību.
PH reaģējošs fluorescences sensors
Fluorescences intensitāteFluoresceīna izotiocianāts is significantly affected by the pH value of the solution. In weakly acidic environments (pH 5.0-6.5), protonation of FITC groups leads to increased fluorescence intensity; Under alkaline conditions (pH>8. 0) fluorescence tiek apdzēsta. Balstoties uz šo raksturlielumu, FITC modificētās nanodaļiņas var izmantot, lai uzraudzītu intracelulārās skābes-bāzes svārstības. Piemēram, FITC biliribīna kompleksa fluorescences intensitāte audzēja mikrovidē ir 2,3 reizes lielāka par normāliem audiem, nodrošinot jaunu metodi audzēja diagnozei.

 

Temperatūras reaģējoša dienasgaismas zonde
FITC fluorescences kalpošanas laiks mainās ar temperatūru. Zemas temperatūras apstākļos (4 grādos) FITC marķēto polimēru mikrosfēru fluorescences kalpošanas laiks tiek pagarināts līdz 5,2 nanosekundēm, kas ir 1,8 reizes augstāka par istabas temperatūru (25 grādi). Šis raksturlielums padara to par ideālu rīku fāzes pārejas procesu un šūnu kriokonservācijas izpētei.
Metāla jonu noteikšanas zonde
FITC ievērojami samazina fluorescences intensitāti, ja to apvieno ar metāla joniem, piemēram, Cu ² ⁺ un Hg ² ⁺, padarot to piemērotu vides uzraudzībai. Piemēram, FITC modificēto silikagela nanodaļiņu noteikšanas robeža ir 0. 1 nm Hg ² ⁺ ūdenī, kas ir 100 reizes augstāks nekā tradicionālā atomu absorbcijas spektroskopija.

Lauksaimniecība un mājlopi: no patogēna noteikšanas līdz dažādības uzlabošanai

 

FITC pielietojums lauksaimniecības jomā pakāpeniski paplašinās, ieskaitot augu vīrusa noteikšanu, dzīvnieku slimību diagnozi un dažādības tīrības identificēšanu.
Ātra augu vīrusu noteikšana
FITC marķētās vīrusa antivielas var izmantot, lai noteiktu tabakas mozaīkas vīrusu (TMV), gurķu mozaīkas vīrusu (CMV) un citus vīrusus. Eksperimenti parādīja, ka FITC-ELISA jutība TMV noteikšanai ir 0. 1 ng/ml, kas ir 10 reizes augstāks nekā tradicionālās seroloģiskās metodes. Turklāt FITC marķētās nukleīnskābju zondes var izmantot arī, lai noteiktu eksogēnus gēnus ģenētiski modificētās kultūrās, piemēram, kukaiņu izturīgos BT gēnos.

Dzīvnieku slimību diagnoze
FITC marķētās antivielas var izmantot, lai noteiktu cūku drudža vīrusu (CSFV), putnu gripas vīrusu (AIV) un citus vīrusus.

 

Cūku drudža diagnozē FITC marķētas anti CSFV antivielas saistās ar audu sekcijām un novēro vīrusa sadalījumu caur fluorescences mikroskopiju, samazinot noteikšanas laiku no tradicionālajām metodēm no 3 dienām līdz 6 stundām. Turklāt FITC marķētu plūsmas citometriju var izmantot arī, lai noteiktu patogēnam specifiskas T šūnas dzīvnieku asinīs un novērtētu imūnās reakcijas intensitāti.
Šķirnes tīrības identifikācija
FITC marķētās DNS zondes var izmantot, lai identificētu kultūraugu šķirņu tīrību. Piemēram, FITC zonde, kas mērķēta uz rīsu sprādziena slimības rezistences gēnu, var precīzi atšķirt homozigotus un heterozigotus hibrīda rīsu sēklās ar tīrības identifikācijas precizitāti 99,5%. Turklāt FITC marķētus SSR molekulāros marķierus var izmantot arī mājlopu un mājputnu šķirņu ģenētiskās daudzveidības analīzei, nodrošinot zinātnisku pamatu vaislai.

FITC sintēze: 4- nitroftalisks anhidrīds (sk. C8H3NO5, [{5466-84-2]) reaģē ar rezorcinolu pie 195-200 grādiem 10 stundu laikā, ciklizē 3 'nitrofluorese un 4' - nitroflu maisījumā ar acetilātu, acetilātu un 4 ' - nitroflu, acetilātu maisījumā ar acetilātu un 4' - nitroflu. hydrolyzes with saturated sodium hydroxide ethanol solution, 4 "nitrofluorescein is obtained. Then 4 '- nitrofluorescein is dissolved in ammonia water, reacted with nickel Rexhlet and hydrazine hydrate at room temperature for 2h, and reduced to 4' - amino fluorescein. The most radical is acylated and eliminated to obtainFluoresceīna izotiocianāts.

FITC tīrs produkts ir dzeltens vai oranžs kristālisks pulveris, kas viegli šķīst ūdenī un spirta šķīdinātājā. Ir divi izomēri, starp kuriem I tipa izomērs ir labāks efektivitāte, stabilitāte un saistīšanās ar olbaltumvielām. FITC molekulmasa ir 389,4, maksimālais absorbcijas viļņa garums ir 490 ~ 495 nm, un maksimālais emisijas viļņa garums ir 520 ~ 530 nm, parādot spilgti dzeltenu zaļu fluorescenci. FITC daudzus gadus var uzglabāt aukstās, tumšās un sausās vietās, un tas ir visplašāk izmantotais fluoresceīns. Tās galvenā priekšrocība ir tā, ka cilvēka acs ir jutīgāka pret dzeltenīgi zaļu, un zaļā fluorescence sekcijas paraugā parasti ir mazāka par sarkanu.

Populāri tagi: Fluoresceīna izotiocianāts CAS 27072-45-3, piegādātāji, ražotāji, rūpnīca, vairumtirdzniecība, pirkšana, cena, lielapjoma, pārdošanā