Bremelanotīds(saite:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/peptide/bremelanotide-powder-cas-189691-06-3.html) ir sintētisks polipeptīdu hormons, kura struktūra ir līdzīga leptīnam, tirozīnam un ādas melanīnam, kas dabiski pastāv cilvēka organismā. Kā jauna veida zāles Bremelanotīdam ir regulējoša funkcija, un to bieži lieto erektilās disfunkcijas un zema libido ārstēšanā. Lietošanas scenāriji ikdienas dzīvē kļūst arvien plašāki. Pateicoties cilvēku padziļinātai izpētei par viņu, cilvēki ir atklājuši daudzus viņa sintēzes metožu veidus, kas tiks analizēti pa vienam tālāk.
1. Sintezēts no L-tirozīna:
Sākotnējā sintēzes metodē Bremelanotīda struktūra tika iegūta, deformējot L-tirozīnu. Pirmkārt, L-tirozīns tiek pārveidots par dipeptidil-L-tirozīnu (Boc-Tyr(OCO)2-OH) fluorūdeņražskābes klātbūtnē, kur Boc apzīmē sukcinimidometil (t-butoksikarbonil) grupu. Pēc tam pievienojiet benzilspirtu (PhCH2OH), 1-(3-dietilaminopropoksi)-2-(2-metazolil)etānu (EDC) un N-hidroksibutāndiolu tetrahidrofurāna (THF) reaģentos. piemēram, imīds (HOBt) var apvienot dipeptidil-L-tirozīnu ar pseidopeptīdu alanīnu (Phe-Aib-Aib-Lys(Ac)-Gly-Lys(Ac)-Aib-Leu-NH2) tika sintezēts Bremelanotīdā.
(1) L-tirozīna pārvēršana par dipeptidil-L-tirozīnu:
Vispirms izšķīdiniet L-tirozīnu ūdenī un pievienojiet atbilstošu daudzumu fluorūdeņražskābes. Parasti L-tirozīna koncentrācija ir 1M un fluorūdeņražskābes daudzums ir 5-10%. Maisījumam ļāva nostāvēties 0-4 grādu temperatūrā 1 stundu un pēc tam atdzesēts.
Pēc tam iegūto L-tirozīna-fluorūdeņražskābes kompleksu pa pilienam pievienoja tetrahidrofurānam. Tajā pašā laikā tetrahidrofurānam tika pievienots atbilstošs reakcijas reaģentu daudzums, piemēram, benzilspirts, EDC un HOBt. Pēc 2 stundu nostāvēšanas maisot var iegūt dipeptidil-L-tirozīnu (Boc-Tyr(OCO)2-OH).
(2) Dipeptidil-L-tirozīna reakcija ar pseidopeptīda alanīnu:
Iegūto dipeptidil-L-tirozīnu izšķīdina N,N-dimetilformamīdā (DMF) un pievieno pseidopeptīda alanīnu. Reakcijas apstākļi ietver temperatūru, reakcijas laiku un reaģentu koncentrāciju utt. Šie faktori ietekmēs produkta iznākumu un tīrību. Koncentrācijā 225 g/l Boc-Tyr(OCO)2-OH attiecība pret pseidopeptīda alanīnu bija 1:30.
Pēc maisīšanas un stāvēšanas -N,N-dimetilformamīdā 24 stundas reakcijas šķīdumu ielej ledus ūdenī un nogulsnēja ar skāba aldehīda šķīdumu. Rezultāts ir Bremelanotīda galaprodukts.
Sintēzes metodei galvenokārt ir šādas priekšrocības: augsta produkta tīrība un vienkāršs ražošanas process. Taču šai metodei ir arī daži trūkumi, piemēram, laikietilpība, augstas izmaksas un tā tālāk.
2. Cietās fāzes sintēze:
Cietās fāzes sintēze pašlaik ir viena no visbiežāk izmantotajām Bremelanotīda sintēzes metodēm, un tā ir arī galvenā sintēzes metode peptīdu sintēzes jomā. Cietās fāzes metodēs polipeptīdu ķēdes tiek veidotas, secīgi pievienojot aminoskābju vienības. Pirmkārt, pirmā aminoskābes vienība tiek pārveidota par steriski ierobežojošu un nesadalāmu N-aizsargājošo grupu (piemēram, Fmoc), kas pēc tam tiek pievienota porainajai barotnei. Pēc tam, ieviešot akrilskābes aizsarggrupu, acilēšanas reakciju un citus posmus, katra aminoskābes vienība tiek pievienota porainajai barotnei, un pakāpeniski tiek konstruēta pilnīga polipeptīdu ķēde. Visbeidzot, N-aizsargājošās grupas noņemšanas, denitrifikācijas utt. posmos var sagatavot Bremelanotīda polipeptīda ķēdi ar noteiktu secību.
Cietās fāzes sintēzes metodei galvenokārt ir šādas priekšrocības: augsta efektivitāte un augsts izejvielu izmantošanas līmenis. Bet šai sintētiskajai metodei ir arī daži trūkumi, piemēram, ražošanas procesā ir jāveic vairākas žāvēšanas un mazgāšanas darbības, un šīs darbības novedīs pie produkta kvalitātes pazemināšanās.
3. Šķidrās fāzes sintēze:
Šķidrās fāzes sintēze ir vēl viena Bremelanotīda sintēzes metode, ko veic, izmantojot šķidruma reakcijas sistēmu. Sintēzes metodes galvenie posmi ietver izejvielu skrīningu, zāļu molekulu dizainu, sintēzes ceļa izvēli, reakciju, attīrīšanu un tamlīdzīgi. Salīdzinot ar cietās fāzes sintēzi, šķidrās fāzes sintēzes metode var iegūt Bremelanotīdu ar augstāku tīrību un bioloģisko aktivitāti. Šķidrās fāzes sintēzes metodē parasti izmantotie reakcijas reaģenti ir dihidroksietilmerkaptāns (EDT), etoksikarbonilēšanas līdzeklis (EEDQ), tioacetilhlorīds utt.
Šķidrās fāzes sintēzes metodei galvenokārt ir šādas priekšrocības: vienkārša darbība un augsta produkta tīrība. Tomēr šai sintēzes metodei ir arī daži trūkumi, piemēram, ilgāks sintēzes periods un augstākas izmaksas.
4. Fizikāli ķīmiskā sintēze:
Fizikāli ķīmiskās sintēzes metodē Bremelanotīdu sintezē ar fizikālām un ķīmiskām metodēm. Šai metodei galvenokārt ir divas dažādas pieejas: viena ir Bremelanotīda sintēzes realizācija, atkārtoti veicot cietās-šķidruma fāzes transformāciju; otrs ir veicināt polipeptīdu ķēžu pašsavienošanos un polimerizāciju, izmantojot fizisku un mehānisku saspiešanu, tādējādi sintezējot Bremelanotīdu.
Reakcijas mehānisms:
Bremelanotīda sintēze galvenokārt notiek, pārvēršot L-tirozīnu L-fenola acilātā, pēc tam sintezējot L-fenola acilātu un pseidopeptīdu un visbeidzot iegūstot produktu. Reakcijas mehānisms ir šāds:
(1) L-tirozīna pārvēršana L-fenola acilātā:
L-tirozīns reaģē ar nātrija azīdu THF šķīdumā, veidojot L-fenola acilātu. Nātrija azīds pārvērš hidroksilgrupu tirozīnā par azīda grupu, un pēc tam apstrāde ar skābi pārvērš azīda grupu par fenola acilātu.
(2) L-fenola acilāts tiek pārveidots par skābes hlorīdu:
L-fenola acilāts reaģē ar acetilhlorīdu THF, veidojot skābes hlorīdu. Piecas reizes lielāks TBHS daudzums ir paredzēts, lai absorbētu radīto HCl. Skābes hlorīdi ir reakcijas starpprodukti, kas nepieciešami turpmākajām reakcijām.
(3) Skābes hlorīda un pseidopeptīda sintēze:
Starpprodukts skābes hlorīds reaģē ar pseidopeptīdu DMF, veidojot Bremelanotīda polipeptīdu ķēdi. Šajā posmā notiek anhidrīda kondensācijas reakcija, kurā HOBt ir katalizators.
(4) Produkta attīrīšana un analīze:
Galaprodukts ir arī jāattīra un jāanalizē, lai nodrošinātu savienojuma tīrību un kvalitāti.
Fizikāli ķīmiskās sintēzes metodei galvenokārt ir šādas priekšrocības: vienkārša darbība un īss sagatavošanas laiks. Tomēr šai sintētiskajai metodei ir arī daži trūkumi, piemēram, zema produkta tīrība un nepietiekama produktu daudzveidība.
Visbeidzot, Bremelanotīda sintēzes metodes ir daudzveidīgas un elastīgas, un izvēle ir atkarīga no daudziem faktoriem, piemēram, reakcijas apstākļiem, sintēzes izmaksām un reakcijas laika utt. Neatkarīgi no izmantotās metodes stabili reakcijas apstākļi un augstas tīrības produkti ir Bremelanotīda sintēzes atslēga.