Galvenā sastāvdaļaIGF 1 LR3 aerosolsir IGF-1 LR3 (Long R3 Insulin like Growth Factor-1), kas ir ģenētiski modificēts insulīnam līdzīgs augšanas faktors-1 (IGF-1) analogs. Tas var mainīt muskuļu zudumu, kavējot olbaltumvielu sadalīšanos un veicinot muskuļu sintēzi, bet pašlaik tas attiecas tikai uz preklīniskiem pētījumiem. Eksperimenti ar dzīvniekiem ir parādījuši, ka IGF-1 LR3 var uzlabot muskuļu šķiedru struktūru, taču izmēģinājumi ar cilvēkiem vēl nav veikti. IGF-1 LR3 neirotrofiskā iedarbība var veicināt aksonu reģenerāciju un neironu izdzīvošanu, taču tā spēja iekļūt hematoencefālisko barjerā ir jāturpina apstiprināt. Tas paātrina brūču dzīšanu, stimulējot fibroblastu proliferāciju, taču jāievēro piesardzība pret hipoglikēmijas risku.
|
|
|
IGF 1 LR3 COA
Izejvielas un gēnu inženierijas modifikācija
produktu atslēgas tehnoloģijas
Gēnu avota un saimnieka izvēle
IGF 1 LR3 aerosolstiek ražots, izmantojot ģenētiskās rekombinācijas tehnoloģiju, un tā gēnu secība ir modificēta, pamatojoties uz cilvēka insulīnam{0}}līdzīgo augšanas faktoru-1 (IGF-1). Ekspresijas saimnieks parasti tiek izvēlēts no Escherichia coli (piemēram, COH celmiem) vai zīdītāju šūnām (piemēram, CHO šūnām), starp kurām E. coli sistēma tiek plaši izmantota tās augstās efektivitātes un zemo izmaksu dēļ augsta blīvuma fermentācijā.
Aminoskābju secības modifikācija
R3 mutācija: trešā dabiskā IGF-1 aminoskābe ir glutamīnskābe (Glu), ko arginīns (Arg) aizstāj ar IGF-1 LR3, veidojot "R3" marķieri. Šī mutācija ievērojami samazina tās afinitāti pret insulīnam līdzīgajiem augšanas faktoru saistošajiem proteīniem (IGFBP), palielina tās brīvo koncentrāciju vairāk nekā 1000 reizes un palielina tā bioloģisko aktivitāti 2-3 reizes.
N-gala paplašinājums: pievienojiet 13 aminoskābju atlikumus B ķēdes galā, lai izveidotu ķēdes struktūru, kas sastāv no 83 aminoskābēm (dažā literatūrā ir minētas 93 aminoskābes, kas var būt saistīts ar atšķirībām attīrīšanas procesos vai noteikšanas metodēs), vēl vairāk optimizējot tās darbību.
Fermentācijas un attīrīšanas process
fermentācijas process
Augsta blīvuma fermentācija: Escherichia coli ekspresiju izraisa karstuma šoks 42 grādu temperatūrā, un fermentācijas tvertne var sasniegt 50 l. Mērķa proteīns veido 30–40% no kopējā baktēriju proteīna.
Kultivēšanas barotnes optimizēšana: kontrolējiet vielmaiņas blakusproduktu (piemēram, etiķskābes) uzkrāšanos un uzlabojiet produkta tīrību, izmantojot barošanas partiju audzēšanas stratēģiju.
Attīrīšanas process
Neapstrādāts un tīrs posms:
Jonu apmaiņas hromatogrāfija: izmanto olbaltumvielu lādiņu starpības atdalīšanu, lai palielinātu tīrību līdz vairāk nekā 90%.
Hidrofobās mijiedarbības hromatogrāfija: tālāk noņem piemaisījumus, sasniedzot tīrību virs 95%.
Tīra stadija:
Molekulārās izslēgšanas hromatogrāfija (SEC-HPLC): atdaliet mērķa proteīnus no dimēriem vai oligomēriem, kuru tīrība ir lielāka vai vienāda ar 95% (noteikts ar SDS-PAGE).
Ultrafiltrācijas koncentrācija: Koncentrējiet proteīnu, izmantojot tangenciālās plūsmas filtrēšanas tehnoloģiju, vienlaikus aizstājot buferšķīdumu ar PBS (pH 7,4) sistēmu.
Termināla filtrēšana: Sterilizācijai izmantojiet 0,22 μm filtra membrānu, lai nodrošinātu sterilitāti.
kvalitātes kontrole
Aktivitātes pārbaude: Bioloģiskā aktivitāte tika mērīta ar MCF-7 cilvēka krūts vēža šūnu proliferācijas testu bez seruma, un ED50 vērtība bija mazāka vai vienāda ar 1,5 ng/ml.
Tīrības pārbaude: SDS-PAGE un SEC-HPLC kombinētā noteikšana, tīrība ir lielāka vai vienāda ar 95%.
Piemaisījumu kontrole: endotoksīna saturs mazāks vai vienāds ar 10 EU/mg, saimniekproteīna atlikums Mazāks vai vienāds ar 0,005%, eksogēnā DNS atlikums Mazāks vai vienāds ar 10 ng/mg.
Sagatavošanas process un stabilitāte
Sasaldē žūšanas aizsargājoša formula
Izmantojot 8% trehalozes vai 5% mannīta kā sasaldēšanas aizsarglīdzekļus, apvienojumā ar 0,01% Tween 80 (šķīdinātāju), šķidrais proteīns tiek pārvērsts baltā pulverī, izmantojot liofilizēšanas tehnoloģiju, ar mitruma saturu mazāku par 3%.
Stabilitātes garantija
Ilgtermiņa uzglabāšana
Liofilizētu pulveri var uzglabāt 36 mēnešus no -20 līdz -80 grādiem, un pēc izšķīdināšanas to var novietot sterilos apstākļos -20 līdz -80 grādu temperatūrā 6 mēnešus un 2 grādu līdz 8 grādu temperatūrā 7-10 dienas.
Transportēšanas apstākļi: Zilās ledus pakas transportēšanai tiek uzglabātas ledusskapī, nodrošinot 2-8 grādu temperatūru un izvairoties no atkārtotas sasalšanas un atkausēšanas.
Ražošanas iekārtas un GMP atbilstība
Pamataprīkojums
Fermentācijas sistēma: 50L pilnībā automātiska fermentācijas tvertne (aprīkota ar pH, izšķīdušo skābekli, temperatūras tiešsaistes monitoringa sistēmu).
Attīrīšanas sistēma: AKTA Avant proteīnu attīrītājs (atbalsta automatizētu hromatogrāfisko atdalīšanu).
Sagatavošanas aprīkojums: Mini Spray Dryer B-290 (smidzināšanas žāvētājs) vai liofilizēšanas mašīna (pulvera sagatavošanai).
Analītiskie instrumenti: HPLC-MS (molekulmasas apstiprinājums), dinamiskais gaismas izkliedes analizators (daļiņu izmēra sadalījuma noteikšana), ar enzīmu -saistīts imūnsorbcijas tests (ELISA).
GMP atbilstība
Ražošanas vide atbilst "Labai zāļu ražošanas praksei (pārskatīta 2010. gadā)" un stingri kontrolē tādus rādītājus kā baktēriju endotoksīni un saimniekproteīnu atliekas.
Nodrošiniet pilnīgu kvalitātes dokumentāciju, tostarp COA (kvalitātes sertifikātu), MSDS (drošības datu lapu) un regulējošos atbalsta dokumentus.
IGF 1 LR3 aerosols izkropļo glia šūnu metabolisko fenotipu un funkcionālo diferenciāciju
IGF 1 LR3 aerosolsir preparāts, kas satur IGF-1 LR3 komponentu, kas ir mākslīgi modificēts ilgstošas-darbības insulīnam-līdzīgs augšanas faktors. Tam ir augstāka aktivitāte nekā dabiskajam IGF-1, garāks pussabrukšanas periods organismā un labāka augšanu veicinoša iedarbība, kas var veicināt lielāko daļu šūnu dalīšanos, migrāciju un diferenciāciju. Medicīnas jomā IGF-1 LR3 ir saņēmis plašu uzmanību tā unikālo bioloģisko īpašību dēļ un ir pētīts, lai izpētītu dažādu slimību terapeitisko potenciālu.
Glia šūnas ir svarīga centrālās nervu sistēmas sastāvdaļa, tostarp mikroglijas, astrocīti un citi. Viņiem ir neaizstājama loma nervu sistēmas normālas darbības uzturēšanā, neironu izdzīvošanas atbalstīšanā un imūnreakcijās. Gliju šūnu metaboliskais fenotips un funkcionālais stāvoklis ir cieši saistīts ar nervu sistēmas veselību, un jebkuri faktori, kas ietekmē to vielmaiņu un darbību, var būtiski ietekmēt nervu sistēmu.
Metaboliskais fenotips un glia šūnu funkcija
Gliju šūnu veidi un izplatība
Centrālās nervu sistēmas glia šūnas galvenokārt ietver mikrogliju un astrocītus. Mikroglijas ir imūnās šūnas centrālajā nervu sistēmā, plaši izplatītas visā smadzenēs un muguras smadzenēs. Tie darbojas kā nervu sistēmas "sargi", pastāvīgi uzraugot izmaiņas apkārtējā vidē un spēlējot izšķirošu lomu nervu sistēmas imūnās homeostāzes uzturēšanā. Astrocīti ir visizplatītākais glia šūnu veids centrālajā nervu sistēmā, kam ir dažādas formas un funkcijas. Astrocīti savos procesos veido ciešus savienojumus ar neironiem, asinsvadiem utt., piedalās asins-smadzeņu barjeras veidošanā, nodrošina neironu uzturvērtību, regulē neirotransmiteru uzņemšanu un metabolismu, kā arī būtiski ietekmē normālu neironu darbību un neironu signālu pārraidi.
Normālu glia šūnu metaboliskais fenotips
Normālos fizioloģiskos apstākļos glia šūnām ir specifiski vielmaiņas fenotipi. Microglia veic imūnās uzraudzības funkcijas miera stāvoklī, un to vielmaiņas aktivitāte ir salīdzinoši zema, galvenokārt paļaujoties uz oksidatīvās fosforilācijas ceļiem, lai iegūtu enerģiju. Stimulējot patogēnu invāziju, audu bojājumus utt., aktivizējas mikroglijas, un to metaboliskais fenotips piedzīvo būtiskas izmaiņas, pārejot uz vielmaiņas režīmu, kurā dominē glikolīze, ātri ražojot enerģiju un bioaktīvas molekulas, lai tiktu galā ar ārējiem izaicinājumiem. Normālos apstākļos astrocītu metaboliskā aktivitāte tiek pielāgota neironu vielmaiņas vajadzībām. Tie nodrošina enerģijas atbalstu sev un neironiem, izmantojot aerobo oksidāciju, uzņemot glikozi. Tajā pašā laikā astrocīti piedalās arī glutamāta glutamīna ciklā, pārvēršot neironu izdalīto glutamātu par glutamīnu un transportējot to atpakaļ uz neironiem, lai atkal sintezētu glutamātu. Šis process ir ļoti svarīgs, lai uzturētu neirotransmitera līdzsvaru un normālu neironu darbību.
Gliju šūnu funkcijas
Glia šūnām ir vairākas svarīgas funkcijas centrālajā nervu sistēmā. Kā imūnās šūnas mikroglija var atpazīt un likvidēt patogēnus, bojātas šūnas un patoloģiskus olbaltumvielu agregātus, kā arī piedalīties neiro-iekaisuma reakciju regulēšanā. Neironu attīstības laikā mikroglijas piedalās arī sinaptiskajā atzarošanā, palīdzot veidot normālus neironu ķēžu savienojumus.
Astrocītu funkcijas ir plašākas. Tie ne tikai nodrošina neironu uzturvērtību un strukturālu atbalstu, bet arī piedalās neirotransmiteru izdalīšanās un uzņemšanas regulēšanā, uzturot neirotransmiteru homeostāzi. Turklāt astrocīti regulē smadzeņu asinsriti un piedalās asins-smadzeņu barjeras funkcijas uzturēšanā, mijiedarbojoties ar asinsvadiem, aizsargājot nervu sistēmu no kaitīgām vielām perifērijā.
IGF-1 LR3 Spray ietekme uz glia šūnu izkropļoto metabolisko fenotipu
Izmaiņas vielmaiņas ceļos
IGF-1 LR3 IGF-1 LR3 Spray var aktivizēt pakārtotos signalizācijas ceļus, saistoties ar IGF-1 receptoriem uz glia šūnu virsmas, tādējādi ietekmējot glia šūnu vielmaiņas ceļus. Runājot par enerģijas metabolismu, IGF-1 signalizācijas ceļa aktivizēšana var veicināt glia šūnu pāreju no oksidatīvās fosforilācijas uz glikolīzi. Normālos apstākļos oksidatīvā fosforilēšana ir galvenais veids, kā šūnas var ražot enerģiju ar augstu efektivitāti, bet salīdzinoši lēnu ātrumu; Lai gan glikolīze ražo mazāk enerģijas, tā var ātri nodrošināt enerģiju īsā laika periodā.
Kad IGF-1 LR3 iedarbojas uz glia šūnām, tas var paaugstināt glikolītisko enzīmu ekspresiju un pastiprināt glikolītisko aktivitāti, aktivizējot signālu ceļus, piemēram, PI3K/Akt un Ras/MAPK. Šī vielmaiņas ceļa maiņa var izraisīt glia šūnu enerģijas piegādes režīma "izkropļojumus", kā rezultātā rodas neparasti enerģijas metabolisma regulējumi, saskaroties ar dažādiem fizioloģiskiem vai patoloģiskiem stāvokļiem.
Populāri tagi: igf 1 lr3 aerosols, piegādātāji, ražotāji, rūpnīca, vairumtirdzniecība, pirkt, cena, vairumā, pārdošana