Dihidroetidijs, CAS numurs 104821-25-2, molekulārā formula C21H21N3 ar precīzu molekulmasu 315,41, ir svarīgs savienojums ar plašu bioloģisko pielietojumu. Parasti tas parādās kā smalks kristālisks pulveris, sākot no rozā līdz purpursarkanai. Šī unikālā krāsa ļauj ērti atpazīt laboratorijā un nodrošina dabisku dienasgaismas fonu tā izmantošanai kā dienasgaismas zondei. Ķīmiskajos un bioloģiskajos pētījumos to bieži izmanto kā zondi, lai noteiktu reaktīvās skābekļa sugas, īpaši intracelulāru superoksīda anjonu noteikšanā, parādot ārkārtīgi augstu efektivitāti. Šī krāsviela var brīvi iekļūt šūnās un dehidrogenēt, veidojot etiīdija bromīdu. Šī zonde ir plaši izmantota NK šūnās un kā svarīga krāsviela šūnu proliferācijas un hipoksijas identificēšanai audzējos.
|
|
|
|
Ķīmiskā formula |
C56H92O29 |
|
Precīza masa |
1229 |
|
Molekulmasa |
1229 |
|
m/z |
1229 (100.0%), 1230 (60.6%), 1231 (18.0%), 1231 (6.0%), 1232 (3.6%), 1232 (3.5%), 1230 (1.1%), 1233 (1.1%), 1230 (1.1%) |
|
Elementārā analīze |
C, 54.71; H, 7.54; O, 37.74 |
Dihidroetidijs, Kā zilā fluorescējošā zonde, kas var iekļūt šūnās, ir svarīga loma bioloģijas un medicīnas jomā. Tās unikālās fluorescences īpašības ļauj tai noteikt superoksīda anjonu (O2-) līmeni šūnās, tādējādi atklājot reaktīvo skābekļa sugu mehānismus šūnu fizioloģijā un patoloģijā.
1. Šūnu attēlveidošana
Dihidroetilēns kā fluorescējoša zonde var iekļūt šūnās un saistīties ar DNS, izstarojot sarkano fluorescenci. Tāpēc to plaši izmanto šūnu attēlveidošanas tehnoloģijā, lai uzraudzītu redoksa stāvokli šūnās reālā - laikā. Izmantojot tādas iekārtas kā fluorescences mikroskopija vai plūsmas citometrija, pētnieki var novērot dihidroetilēndiamīna sadalījumu un izmaiņas šūnās, tādējādi izprotot šūnu redoksa stāvokli fizioloģiskos vai patoloģiskos stāvokļos.
2. Redoksa stāvokļa noteikšana
Etilēna dihidrogēna lietošanas fluorescences īpašības padara to par ideālu instrumentu redoksa stāvokļa noteikšanai. Šūnās dihidroetilēndiamīnu var oksidēt ar superoksīda anjoniem, veidojot etilēndiamīnu, kas pēc tam saistās ar DNS un izstaro sarkano fluorescenci. Tāpēc, nosakot dihidrolēndiamīna fluorescences intensitāti, intracelulāro superoksīda anjonu līmeni var netieši atspoguļot, tādējādi novērtējot šūnu redoksa stāvokli. Šai noteikšanas metodei ir augstas jutības, specifiskuma un augstas - caurlaides priekšrocības, nodrošinot jaudīgu rīku šūnu redoksa statusa dinamisko izmaiņu izpētei.
3. Audzēja izpēte
Dihidroetilēnam ir plašs pielietojums audzēju izpētē. Sakarā ar augstu audzēja šūnu redoksa līmeni, dihidroetilēndiamīns var kalpot par efektīvu audzēja marķieri audzēju agrīnai diagnozei un terapeitiskai novērtēšanai. Turklāt dihidroetilēndiamīnu var izmantot arī, lai izpētītu audzēja šūnu proliferācijas, apoptozes un iebrukuma bioloģiskos procesus, nodrošinot svarīgus norādījumus audzēja rašanās un attīstības mehānismu atklāšanai.
4. Narkotiku skrīnings
Dihidroetilēndiamīnam ir arī liela nozīme narkotiku skrīningā. Daudzas zāles, lai arī veic terapeitisko iedarbību, arī ietekmē šūnu redoksa stāvokli. Tāpēc, nosakot dihidilēnēndiamīna fluorescences intensitāti, var novērtēt zāļu ietekmi uz šūnu redoksa stāvokli, un potenciālās terapeitiskās zāles var izsvītrot. Turklāt dihidroetilēndiamīnu var izmantot arī, lai izpētītu mijiedarbības mehānismu starp zālēm un audzēja šūnām, nodrošinot lielu atbalstu zāļu izstrādei un klīniskai lietošanai.
5. Bioloģiskās drošības novērtējums
Dihidroetilēnu var izmantot arī bioloģiskās drošības novērtēšanas jomā. Vides piesārņotāju un toksīnu ietekmē šūnu redokss var mainīties. Nosakot dihidroetilēndiamīna fluorescences intensitāti, šo vielu ietekmi uz šūnu redoksa stāvokli var novērtēt, tādējādi novērtējot to bioloģisko drošību. Šai metodei ir liela nozīme, lai novērtētu vides piesārņotāju iespējamos riskus un nodrošinātu cilvēku veselību.
Detalizēti soļi un atbilstošie ķīmiskie vienādojumidihidroetidijsLaboratorijā ir process, kas saistīts ar organisko ķīmisko sintēzi.
1. Izejvielu sagatavošana
Izejas materiāli: izvēlieties piemērotu izejmateriālu, kas var būt savienojums, kas satur benzola gredzenu un aminogrupu.
Šķīdinātāji un katalizatori: atlasiet atbilstošus šķīdinātājus (piemēram, etanolu, metanolu utt.) Un katalizatorus (piemēram, pārejas metāla katalizatorus), pamatojoties uz reakcijas veidu.
2. Pirmā soļa reakcija: benzola gredzena ievads un modifikācija
Reakcijas tips: aromātisko ogļūdeņražu aizvietošanas reakcija vai savienošanas reakcija.
Īpašas darbības: ar katalizatora darbību izejmateriālu reaģē ar atbilstošu benzola gredzenu, ieviešot reaģentus (piemēram, fenilboronskābi, halogenētu benzolu utt.), Lai ieviestu benzola gredzena struktūru.
Ķīmiskais vienādojums: Sakarā ar specifisko reaģentu un produktu nezināmu struktūru, šeit tiek izmantota vispārējā formula:
Izejmateriāls+benzola gredzena ievads reaģents → 1. starpposma produkts
3. Otrā soļa reakcija: Amino grupu ieviešana vai modifikācija
Reakcijas tips: aminēšanas reakcija vai amīna aizvietošanas reakcija.
Īpašie soļi: atbilstošos apstākļos reaģējiet uz starpposma 1. produktu ar aminēšanas reaģentiem (piemēram, amīniem, azīdiem utt.), Lai ieviestu vai modificētu aminogrupas.
Ķīmiskais vienādojums:
Starpposma produkts 1+ aminēšanas reaģents → starpposma produkts 2
4. Trešā soļa reakcija: hidrogenēšanas reakcija
Reakcijas tips: hidrogenēšanas reakcija.
Īpašas darbības: ar katalizatoru (piemēram, platīna, pallādija utt.) Un ūdeņraža gāzi darbību starpposma 2. produkts tiek hidrogenēts, lai iegūtu dihidroetilēna lietojumu vai tā analogus.
Ķīmiskais vienādojums:
Starpposma produkts 2+ H2 → Dihidroetilēna lietošana (vai līdzīga)
5. attīrīšana un raksturojums
Attīrīšana: attīriet produktu, izmantojot tādas metodes kā pārkristalizācija un kolonnu hromatogrāfija.
Raksturojums: Izmantojiet tādas metodes kā masas spektrometrija, infrasarkanā spektroskopija un kodola magnētiskā rezonanse, lai raksturotu produktu un apstiprinātu tā struktūru un tīrību.
Dihidroetidijs(DHE) ir fluorescējoša zonde, ko plaši izmanto bioloģiskos pētījumos. Tās unikālās fluorescences īpašības dod tai ievērojamas priekšrocības intracelulāru reaktīvo skābekļa sugu (īpaši superoksīda anjonu) noteikšanā. Šis ir detalizēts ievads etilēna dihidrogēna lietņu fluorescences īpašībās:
Dihidretilēns pats ir nefluorescējošs savienojums, bet, nonākot šūnās, to var oksidēt ar intracelulāriem superoksīda anjoniem (O ₂ ⁻), tādējādi pārvēršoties etilēnā. Etilēnglikols ir fluorescējošs savienojums, kas var saistīties ar DNS un RNS. Tāpēc, kad dihidroetilēnglikols tiek oksidēts līdz etilēnglikolam, tas saistīsies ar nukleīnskābēm šūnās un izstaros spēcīgu sarkano fluorescenci.
Pirms un pēc oksidācijas notiek ievērojamas izmaiņas dihidroetiloletoņu fluorescences spektrālajās īpašībās. Ja tas nav oksidēts, pati dihidroetilkolēšana neizstaro fluorescenci. Kad tas tiek oksidēts līdz etilēnoksīdam, tā maksimālais ierosmes viļņa garums parasti ir ap 488 nm vai 530 nm, un tā maksimālais emisijas viļņa garums ir ap 610 nm. Tas padara to saderīgu ar parasto fluorescences mikroskopu vai plūsmas citometru filtru sistēmām, atvieglojot fluorescences attēlveidošanu un kvantitatīvo analīzi.
Dihidroetilsulfāta fluorescences intensitāte ir pozitīvi korelēta ar intracelulāro superoksīda anjonu līmeni. Palielinoties intracelulāro superoksīda anjonu koncentrācijai, vairāk dihidroetilēndiamīna tiek oksidēts līdz etilēndiamīnam, kas saistās ar nukleīnskābēm un izstaro spēcīgākus fluorescences signālus. Tāpēc, nosakot dihidilēndiamīna fluorescences intensitāti, intracelulāro superoksīda anjonu līmeni var netieši atspoguļot.
Fluorescējošajam kompleksam, kas veidojas, kombinējot dihidroetilēnglikolu un nukleīnskābi, ir augsta stabilitāte, un tas nav viegli balināts vai fermentatīvi hidrolizēts. Tas rada labu dihidroetilēnglikola stabilitāti fluorescencē garos - Termiņa attēlveidošanā vai nepārtrauktos uzraudzības eksperimentos, kas ir labvēlīgi, lai precīzi novērtētu intracelulāro superoksīda anjonu dinamiskās izmaiņas.
Izmantojot etilēndiamīna fluorescences īpašības, pētnieki var izmantot attēlveidošanas paņēmienus, piemēram, fluorescences mikroskopiju vai plūsmas citometriju, lai uzraudzītu un analizētu intracelulāro superoksīda anjonu līmeni reālā - laikā. Šai metodei ir augstas jutības, specifiskuma un augstas - caurlaides priekšrocības, nodrošinot spēcīgu instrumentu reaktīvo skābekļa sugu mehānismu atklāšanai šūnu fizioloģijā un patoloģijā.
Dihidroetidijs (dihidroetidijs, DHE) patiešām ir šūna - caurlaidīga zilā fluorescējošā zonde, ko galvenokārt izmanto, lai šūnās noteiktu superoksīda radikālo anjonu (O2-). Šis ir tā noteikšanas princips un piemērošanas gadījumi bioloģiskajos pētījumos:
Atklāšanas princips
DHE var dehidrogenēt ar intracelulāro superoksīda anjonu, lai radītu etiīdiju (piemēram, etiīdija bromīdu) pēc dzīvu šūnu uzņemšanas. Etidijs var saistīties ar RNS vai DNS, lai iegūtu sarkano fluorescenci. Kad intracelulārā superoksīda anjonu līmenis ir augstāks, tiek ražots vairāk etiīdija un sarkanā fluorescence ir spēcīgāka; Un otrādi, tas ir vājāks. Tas ļauj noteikt superoksīda anjonu līmeni ar DHE. Tajā pašā laikā pati par sevi fluorescē zilā citoplazmā, līdz tā ir oksidēta, un pēc tam tas tiks ievietots šūnu DNS, iekrāsojot kodolu spilgti fluorescējoši sarkans.
Lietojumprogrammu piemēri
ROS ražošanas noteikšana aknu audos: aknu audu sekcijas tiek sagatavotas un inkubētas ar DHE. Pēc tam sekcijas novēro, izmantojot fluorescences mikroskopu, un DHE - pozitīvo šūnu procentuālo daudzumu aprēķina ar kvantitatīvu morfometrisko analīzi, lai novērtētu ROS (reaktīvās skābekļa sugu) ražošanu.
Lai izpētītu antioksidantu enzīmu un glutationa redoksa stāvokļa 34+ šūnu izmaiņas hipoksiskos un normoksiskos stāvokļos: šajā pētījumā superoksīda o2 - tika marķēts, izmantojot DHE un pēc tam pārbaudīja augšupvērstu plūsmu. Rezultāti parādīja, ka skābekļa saturam bija ietekme uz superoksīda un peroksīda veidošanos ar lielāku peroksīda veidošanās ātrumu normoksiskā stāvoklī.
Iepriekš minētie principi un pieteikšanās gadījumi parāda, ka DHE kā superoksīda anjonu fluorescējošā zondei ir plašs pielietojumu klāsts bioloģisko pētījumu jomā. To var izmantot ne tikai, lai novērtētu oksidatīvā stresa līmeni šūnās, bet arī nodrošināt svarīgu pamatu slimību mehānismam un antioksidantu zāļu attīstībai.
Robežas pētījumos
► Radioaktīvo - marķētās zondes dizains
Lai iespējotu superoksīda dinamisko izsekošanu in vivo, pētnieki izstrādāja ¹q - ar marķētu DHE atvasinājumu. Samazinot strukturālās modifikācijas (broma atomu ieviešot tikai benzola gredzenā), tika saglabātas DHE ķīmiskās un bioloģiskās īpašības. PET attēlveidošana atklāja, ka šai zondei bija četrkārtīga išēmiskā miokarda uzņemšana, salīdzinot ar veseliem audiem, parādot būtisku korelāciju ar DHE fluorescences intensitāti (r =0.92, p<0.001), thereby providing a novel tool for early diagnosis of cardiovascular diseases.
► Mitohondriju - mērķtiecīgas zondes attīstība
Lai risinātu nepieciešamību pēc mitohondriju superoksīda noteikšanas, pētnieki sintezēja Mitosox sarkanu (mitohondriju - lokalizēts DHE analogs). Šī zonde ir vērsta uz mitohondrijām, izmantojot trifenilfosfīna daļu, ar tā oksidācijas produktu izstaro apelsīnu - sarkanā fluorescence (510/580 nm). Parkinsona slimības modeļos Mitosox sarkanais noteikšana atklāja, ka mitohondriju superoksīda koncentrācija būtiskajā nigra dopamīnerģiskajos neironos bija paaugstināta pieckārt, salīdzinot ar normālu līmeni, parādoties agrāk nekā apoptotiskie marķieri. Tas nodrošina biomarķieri agrīnai iejaukšanās neirodeģeneratīvo slimību gadījumā.
Populāri tagi: Dihidroetidija CAS 104821-25-2, piegādātāji, ražotāji, rūpnīca, vairumtirdzniecība, pirkšana, cena, lielapjoma, pārdošana