GLP-1(saite:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/peptide/glp-1-peptide-cas-87805-34-3.html) sastāv no divām savstarpēji saistītām polipeptīdu ķēdēm: peptīdu ķēdes ar 21 aminoskābju atlikumu N-galā (GLP-1[7-27]) un peptīdu ķēdes ar 30 aminoskābju atlikumiem C-galā. gala (GLP-1 [28-58]), starp ķēdēm ir kondensācijas tilts. GLP-1 ķīmiskā formula ir C165H264N50O55S2, molārā masa ir aptuveni 3,8 kDa, un CAS 87805-34-3. GLP-1 uzlādes stāvoklis mainās līdz ar pH. Ja pH ir zemāks par GLP-1 izoelektrisko punktu, GLP-1 ir pozitīvi uzlādēts; ja pH ir lielāks par izoelektrisko punktu, GLP-1 ir negatīvi uzlādēts. Fizioloģiskos apstākļos GLP-1 parasti ir negatīvi uzlādēts. Piemīt spēcīga redoksjutība un proteāzes jutība. Fizioloģiskos apstākļos GLP-1 bieži ātri hidrolizē proteāzes, piemēram, tripsīns, tādējādi zaudējot savu bioloģisko aktivitāti. Turklāt siltumenerģija, pH, metālu joni un citi faktori ietekmēs arī GLP stabilitāti-1. Lai uzlabotu GLP stabilitāti{10}}, pētnieki parasti izmanto dažādas metodes tās uzlabošanai, piemēram, ķīmiskās modifikācijas un molekulārās struktūras pielāgošanu.
Izoelektriskais punkts:
GLP-1 ir polipeptīdu hormons, kura izoelektriskais punkts (pI) ir aptuveni 5,1. Izoelektriskais punkts ir pH vērtība, pie kuras noteiktā šķīdumā ir vienāds skaits pozitīvi un negatīvi lādētu jonu. Kad viela atrodas izoelektriskajā punktā, tai nav neto lādiņa, tāpēc tā netiks pakļauta elektroforēzes spēkiem elektriskajā laukā un tāpēc nepārvietosies ne uz vienu polu.
Tā kā GLP-1 izoelektriskais punkts ir zemāks par fizioloģiskās vides pH vērtību, tas būs pozitīvi uzlādēts in vivo. Šādas īpašības ļauj GLP-1 ātri iziet cauri šūnu membrānai caur dažiem molekulārajiem transportētājiem, piemēram, GLP-1 receptoriem (GLP-1R), un saistīties ar GLP-1R. šūnā, tādējādi veicot dažādas fizioloģiskās funkcijas. GLP-1 izoelektriskais punkts ir aptuveni 5,9, tas ir, kad tas ir pie pH=5,9, GLP-1 peptīda molekulas ar neto lādiņu lādiņa numurs ir nulle. Tas nozīmē, ka dažādos pH apstākļos mainīsies arī GLP{11}} lādiņa stāvoklis, tādējādi ietekmējot tā bioloģisko aktivitāti organismā.
Papildus izoelektriskajam punktam GLP-1 ir arī citas fizikālās un ķīmiskās īpašības un strukturālās īpašības, piemēram, molekulmasa, aminoskābju secība, telpiskā konfigurācija, hidrofilitāte, šķīdība utt. Šīs fizikālās un ķīmiskās īpašības un strukturālās īpašības ir liela nozīme GLP-1 darbībā un funkcijās in vivo, un tie ir arī galvenie aspekti GLP-1 izpētē un pielietošanā.
maksa:
GLP-1 ir polipeptīdu hormons. Tās molekulārā struktūra satur divus dabiskos aminoskābju atlikumus, cisteīnu un leicīnu. Šie atlikumi var tikt pakļauti oksidācijas reakcijām, veidojot disulfīda saites (SS saites) īpašos apstākļos. Tādējādi tiek ietekmētas GLP-1 maksas īpašības.
Fizioloģiskā vidē GLP{0}} parasti uzrāda pozitīvi lādētu īpašību. Tas ir tāpēc, ka tā izoelektriskais punkts ir aptuveni 5,1, kas ir zemāks par fizioloģisko vidi ar pH vērtību 7,4, izraisot amīnu grupas N-gala daļēju protonēšanu. padarīt visu molekulu pozitīvi lādētu. Šajā gadījumā GLP-1 var ātri iekļūt un apvienoties ar GLP-1R šūnā, izmantojot dažus transportētājus, piemēram, GLP-1 receptoru (GLP-1R) un veic dažādas fizioloģiskas funkcijas. GLP{10}} uzlādes stāvoklis mainās līdz ar pH. Ja pH ir zemāks par GLP-1 izoelektrisko punktu, GLP-1 ir pozitīvi uzlādēts; ja pH ir lielāks par izoelektrisko punktu, GLP{13}} ir negatīvi uzlādēts. Fizioloģiskos apstākļos GLP-1 parasti ir negatīvi uzlādēts.
Tomēr noteiktos apstākļos GLP-1 SS saiti var samazināt, izraisot tā pozitīvā lādiņa zaudēšanu un tīrā uzlādes stāvokli vai negatīvi lādētas īpašības. Laboratorijā šo reducēšanas reakciju var veicināt reducētājs, piemēram, DTT (ditiotreonskābe), tādējādi mainot GLP -1 lādiņa stāvokli.
Visbeidzot, GLP{0}} lādiņa stāvokli ietekmē daudzi faktori, tostarp tā izoelektriskais punkts, ķīmiskās funkcionālās grupas molekulā un ārējie vides apstākļi. Šīs īpašības un īpašības ir ļoti nozīmīgas GLP-1 funkcijai un lomai in vivo, un tās ir galvenie aspekti GLP-1 izpētē un pielietošanā.
stabilitāte:
GLP-1 ir spēcīga redoksjutība un proteāzes jutība. Fizioloģiskos apstākļos GLP-1 bieži ātri hidrolizē proteāzes, piemēram, tripsīns, tādējādi zaudējot savu bioloģisko aktivitāti. Turklāt siltumenerģija, pH, metālu joni un citi faktori arī ietekmēs GLP stabilitāti-1. Lai uzlabotu GLP-1 stabilitāti, pētnieki parasti izmanto dažādas metodes tās uzlabošanai, piemēram, ķīmisko modifikāciju un molekulārās struktūras pielāgošanu.
Drifta laiks:
GLP-1 (glikagonam līdzīgs peptīds-1) ir polipeptīdu hormons, ko var noteikt un kvantitatīvi noteikt ar masas spektrometriju. Šķidruma hromatogrāfijas-masspektrometrijas (LC-MS) tehnoloģijā GLP-1 dreifēšanas laiks attiecas uz laiku, kas nepieciešams, lai joni dreifētu elektriskā lauka sadursmes dēļ un beidzot sasniegtu detektoru. Dreifa laiks attiecas uz laiku, kad šķīdumā esošās molekulas iziet cauri hromatogrāfijas kolonnai, kas var atspoguļot molekulu izmēru, formu un lādiņa stāvokli. Peptīdu molekulām, piemēram, GLP-1, novirzes laiks parasti ir īss, un to var pabeigt dažu minūšu laikā.
Dreifa laiks ir viens no svarīgākajiem analīzes parametriem masas spektrometrijas tehnoloģijā, ko var izmantot, lai noteiktu atšķirību starp dažādiem savienojumiem un atšķirtu izomērus utt. Attiecībā uz GLP-1 dreifēšanas laiku var izmantot, lai noteiktu atšķirību starp dažādiem savienojumiem. to un citus peptīdus vai piemaisījumus, un turpmāk izmanto kvantitatīvās analīzes veikšanai.
Kopumā LC-MS masas spektrometrijā dreifēšanas laiku ietekmēs daudzi faktori, piemēram, masas spektrometra veids, jonizācijas režīms, sadursmes gāzes veids, spriegums, temperatūra utt. Tāpēc, izmantojot dreifēšanas laiku kā identifikācijas un kvantitatīvās noteikšanas pamatā, eksperimentālie apstākļi ir jāoptimizē un jāstandartizē, lai iegūtu reproducējamus rezultātus.
GLP{0}} dreifēšanas laiks attiecas uz laiku, kas nepieciešams, lai tā joni sasniegtu detektoru elektriskā lauka novirzes dēļ, ko var izmantot kā analītisko parametru LC-MS tehnoloģijā, lai identificētu un kvantitatīvi noteiktu peptīdus un to izomēru ķermenis utt.
Rezumējot, GLP{0}} ir maza peptīda molekula, kas ir ļoti hidrofila un stabila fizioloģiskā vidē, bet ir arī jutīga pret redoksjutību un proteāzes jutību. GLP{1}} fizikālo īpašību izpratnei ir liela nozīme jaunu GLP-1 zāļu izstrādē un to bioloģisko aktivitāšu izpētē.