4-Metilumbelliferil-beta-D-glikuronīds(4-MUG) ir organisks savienojums ar molekulāro formulu C16H13NO7 un CAS 6160-80-1 molāro masu 333,27 g/mol. Tas parasti parādās kā balts vai gaiši dzeltens pulveris vai kristāls. Tam ir laba šķīdība ūdenī un tas var izšķīst ūdenī. Šī savienojuma molekulārā struktūra satur glikuronskābes grupu (GlcA) un 4-metilumbelliferona (4-MeUmb) grupu. Glikuronskābes grupa ir saistīta ar 4-metilumbelliferona grupu, izmantojot glikozīdu saites. Raksturīgās spektrālās īpašības. Piemēram, ultravioletajā gaismā savienojumam ir spēcīga fluorescence, un to var izmantot kvantitatīvās analīzes veikšanai. Tā maksimālais ierosmes viļņa garums un maksimālais emisijas viļņa garums ir attiecīgi 365 nm un 448 nm. Tā ir vāja skābe ar zemāku pKa vērtību ūdenī. Kā substrātam ar fluorescējošām īpašībām tam ir plaša pielietojuma vērtība enzīmu aktivitātes noteikšanā un skrīningā. Tā vienkāršais princips, ērtā darbība, augsta jutība un kvantitatīvā nosakāmība padara to par svarīgu rīku vairākās jomās, piemēram, biomedicīnas, ķīmijas un bioloģijas zinātnēs.
|
|
|
|
Ķīmiskā formula |
C16H16O9 |
|
Precīza Mise |
352 |
|
Molekulārais svars |
352 |
|
m/z |
352 (100.0%), 353 (17.3%), 354 (1.8%), 354 (1.4%) |
|
Elementu analīze |
C, 54.55; H, 4.58; O, 40.87 |
4-Metilumbelliferil-beta-D-glikuronīds(4-MUG) ir fluorescējošs substrāts, ko plaši izmanto enzīmu aktivitātes noteikšanai un skrīningam.
1. Fermentu aktivitātes noteikšana
Princips: 4-MUG enzīmu aktivitātes noteikšana balstās uz tā īpašību, ka to hidrolizē specifiski enzīmi kā substrātu. Kad ferments iedarbojas uz 4-MUG, tas sašķeļ glikozīdiskās saites, atbrīvojot 4-metilumbelliferonu (4-MU) ar fluorescējošām īpašībām. Nosakot fluorescences signālu intensitāti un izmaiņas, var novērtēt enzīmu aktivitāti.
Pieteikuma lauks:
(1) Bioloģiskā parauga analīze: izmantojot 4-MUG kā substrātu, var noteikt specifisku enzīmu aktivitāti bioloģiskajos paraugos (piemēram, asinīs, urīnā, audu homogenātā utt.). Tam ir liela nozīme slimību diagnostikā, zāļu metabolisma pētījumos un biomarķieru atklāšanā.
(2) Enzīmu inhibitoru skrīnings: vienlaikus inkubējot 4-MUG ar enzīmu inhibitoriem, var novērot enzīmu inhibitoru ietekmi uz enzīmu aktivitāti. Šo metodi var izmantot, lai pārbaudītu un novērtētu enzīmu inhibitoru efektivitāti, sniedzot norādījumus zāļu izstrādei un izstrādei.
(3) Fermentu kinētikas pētījumi: izmantojot dažādas koncentrācijas 4-MUG kā substrātus, var izpētīt fermenta kinētiskos parametrus, piemēram, Mihaelisa konstanti (Km) un maksimālo reakcijas ātrumu (Vmax). Šie dati palīdz izprast enzīmu katalizēto reakciju mehānismu un efektivitāti.
2. Enzīmu aktivitātes skrīnings
(1) Augstas caurlaidības skrīnings: 4-MUG ir piemērots augstas caurlaidības enzīmu aktivitātes skrīningam, jo tam ir fluorescences īpašības un tas var nodrošināt ātru un jutīgu noteikšanu. Kopā inkubējot lielu skaitu kandidātu savienojumu ar 4-MUG, var pārbaudīt savienojumus ar fermentu aktivitātes regulēšanu.
(2) Enzīmu inhibitoru skrīnings: izmantojot 4-MUG kā substrātu, var pārbaudīt savienojumus ar enzīmu inhibējošu iedarbību. Šo metodi var izmantot, lai atklātu jaunus enzīmu inhibitorus un nodrošinātu kandidātmolekulas zāļu izstrādei un izstrādei.
(3) Enzīmu aktivatora skrīnings: papildus enzīmu inhibitoriem 4-MUG var izmantot arī savienojumu ar enzīmu aktivācijas efektu skrīningam. Nosakot fluorescences signālu pastiprināšanos, var identificēt savienojumus, kas var uzlabot enzīmu aktivitāti, nodrošinot jaunus fermentu funkciju regulēšanas ceļus.
3. Biofluorescences marķējums: 4-metillumbelliferola-beta-D-glikuronīdam ir fluorescences īpašības, un to bieži izmanto kā biofluorescences marķieri. Tas var izstarot spilgti zilu fluorescenci, ierosinot ultravioleto gaismu, un emisijas spektrs ievērojami pārklājas ar ierosmes spektru, kas ir noderīgi fluorescences noteikšanai un analīzei. Fluorescējošas zondes var izgatavot, saistot 4-metillumbelliferola-beta-D-glikuronīdu ar antivielām, olbaltumvielām vai citām biomolekulām, ko var izmantot mērķa molekulu jutīgai noteikšanai un lokalizācijai bioloģiskajos paraugos.
4. Zāļu metabolisma pētījumi:4-Metilumbelliferil-beta-D-glikuronīdsbieži tiek izmantots kā paraugsavienojums zāļu metabolisma pētījumos. Zāļu metabolisma pētījumos šis savienojums var simulēt dabisko metabolītu struktūru un kalpot par modeli iespējamiem starpproduktiem vai galaproduktiem, kas var rasties zāļu metabolisma laikā. Pētot un raksturojot medikamentu vielmaiņas procesus organismos, varam iegūt dziļāku izpratni par to vielmaiņas ceļiem, kinētiku un biopieejamību.
Laboratorijas sintēzes metode4-Metilumbelliferil-beta-D-glikuronīdsietver šādas darbības:
(1) Aizsarggrupu ieviešana: izvēlieties piemērotas aizsarggrupas, lai aizsargātu glikuronskābi un izvairītos no nevajadzīgām blakusreakcijām turpmākajās reakcijās. Parastās aizsarggrupas ir esteru grupas, ētera grupas utt. Izvēlieties metilesteri kā aizsarggrupu, lai pārvērstu glikuronskābi par metilestera glikuronskābi. Šajā reakcijā kā reaģentus izmanto metanolu un karboksilskābes anhidrīdu, kā katalizatoru izmantojot sērskābi.
Reakcijas vienādojums ir šāds:
(CH3)2C(OH)-CH2-COOH + H2TIK4→ (CH3)2C(O)-CH2-COOH + CH3Ak!
(2) Savienošanas reakcija: Savienošanas reakcija starp 4-metilumbelliferonu un glikuronskābi ar aizsarggrupām. Šim solim parasti ir jāizmanto savienojošie aģenti, piemēram, DCC, EDC utt., lai atvieglotu reakciju. Reakcijas apstākļi ir atbilstoši jākontrolē, lai nodrošinātu produkta tīrību un iznākumu. Šajā reakcijā kā savienojošo vielu izmanto DCC,
(3) Reakcijas vienādojums ir šāds:
(CH3)2C(O)-CH2-COOH + NH2-CH=CH-COOH + DCC + C6H5N3O → (CH3)2C(O)-CH2-CO-NH-CH=CH-COOH + H2O + NH4Ak!
(CH3)2C(O)-CH2-CO-NH-CH=CH-COOH + NH2(CH3) → (CH3)2C(O)-CH2-CO-NH-CH=CH-CO-NH(CH3) + H2O
(CH3)2C(O)-CH2-CO-NH-CH=CH-CO-NH(CH3) + HBr → (CH3)2C(O)-CH2-CO-NH-CH=CH-CO-Br(CH3) + HBr
(CH3)2C(O)-CH2-CO-NH-CH=CH-CO-Br(CH3) → (CH3)2C(O)-CH2-CO[C16H8-(NH-)-6]-Br(CH3) + NaCl + NaBr
(3) Aizsarggrupu noņemšana: izmantojot nātrija metanola un nātrija etanola maisījumu kā katalizatoru, metilglikuronskābes metilesteris tiek noņemts no 4-metilumbelliferilbeta D-glikuronīda. Reakcijas vienādojums ir šāds:
(CH3)2C(O)-CH2-CO[C16H8-(NH-)-6]-Br(CH3) + CH3ONa + C2H5ONa → (CH3)2C(O)-CH2-CO[C16H8-(NH-)-6] + 2NaBr + 2CH3OH + C2H5Ak!
(4) Attīrīšana: neapstrādātu produktu attīra ar kolonnas hromatogrāfiju un pārkristalizāciju, lai iegūtu augstas tīrības pakāpes 4-metillumbelliferola-beta-D-glikuronīdu. Konkrēts process ir šāds:
Neapstrādātu produktu izšķīdina atbilstošā daudzumā šķīdinātāja un atdala to ar kolonnas hromatogrāfiju. Izvēlieties piemērotus adsorbentus un eluentus, pēc kārtas nomazgājiet piemaisījumus un neizreaģējušās izejvielas, lai iegūtu tīrus produktus. Rekristalizācija ir process, kurā tīrus produktus izšķīdina atbilstošā daudzumā šķīdinātāja un iegūst tīrus produktus atdzesējot un kristalizējot. Pārkristalizācija var noņemt nelielu daudzumu nereaģējušo izejvielu un blakusproduktu, vēl vairāk uzlabojot produkta tīrību.
Populāri tagi: 4-methylumbelliferyl-beta-d-glucuronide cas 6160-80-1, piegādātāji, ražotāji, rūpnīca, vairumtirdzniecība, pirkt, cena, lielapjoma, pārdošanai