Fluoreskamīns, ķīmiskā formula C17H10O4, molekulmasa 278,26, CAS numurs 38183-12-9, ir svarīgs ķīmiskais reaģents, ko plaši izmanto bioķīmijas un analītiskās ķīmijas jomās. Tas parasti ir balta vai gandrīz balta pulvera veidā, un dažreiz tas var izskatīties arī gaiši dzeltens. Tā pulverveida forma ļauj viegli darboties un svērt laboratorijā. Šķīdība ūdenī ir zema, šķiet nedaudz šķīstoša. Tomēr tas var labi izšķīst dažādos organiskos šķīdinātājos, piemēram, acetonitrilā, acetonā, etanolā, hloroformā un dimetilsulfoksīdā. Šis šķīdības raksturlielums ļauj sagatavot fluorescējošos amīnus un reaģēt laboratorijā, izvēloties piemērotus šķīdinātājus. Tam pašam nav fluorescences īpašību, bet tas var reaģēt ar savienojumiem, kas satur primārās aminogrupas (piemēram, olbaltumvielas, peptīdus, aminoskābes utt.), lai radītu savienojumus ar spēcīgu fluorescenci. Šī īpašība padara to par svarīgu fluorescējošu atvasinātu reaģentu. Var reaģēt ar primārajām aminoskābju aminogrupām vieglos apstākļos, veidojot stabilus, augstas fluorescences, zema fona kompleksus. Šim kompleksam ir augsta jutība fluorescences noteikšanā, un tāpēc to plaši izmanto aminoskābju kvantitatīvai analīzei un noteikšanai. Olbaltumvielu analīzē tas var reaģēt arī ar proteīnu primārajām aminogrupām, veidojot fluorescējošus atvasinājumus. Nosakot šo atvasinājumu fluorescences intensitāti, var veikt olbaltumvielu satura kvantitatīvo analīzi.
|
|
|
|
Ķīmiskā formula |
C17H10O4 |
|
Precīza Mise |
278 |
|
Molekulmasa |
278 |
|
m/z |
278 (100.0%), 279 (18.4%), 280 (1.6%) |
|
Elementu analīze |
C, 73.38; H, 3.62; O, 23.00 |
Fluoreskamīnsir svarīgs ķīmiskais reaģents ar plašu pielietojumu bioķīmijas un analītiskās ķīmijas jomās.
1. Fluorescences noteikšana un analīze
Aminoskābju noteikšana: Vieglos apstākļos tā var reaģēt ar primāro aminoskābju aminogrupu, veidojot stabilus, augstas fluorescences un zema fona kompleksus. Šim kompleksam ir augsta jutība fluorescences noteikšanā, un to parasti izmanto aminoskābju kvantitatīvai analīzei.
Olbaltumvielu analīze: tā var reaģēt arī ar proteīnu primārajām aminogrupām, veidojot fluorescējošus atvasinājumus, kurus izmanto proteīnu kvantitatīvā noteikšanai un strukturālai izpētei. Nosakot šo atvasinājumu fluorescences intensitāti, var novērtēt olbaltumvielu saturu un strukturālās izmaiņas.
2. Šķidruma hromatogrāfijas fluorescences noteikšana
Augstas izšķirtspējas šķidruma hromatogrāfija (HPLC) apvienojumā ar fluorescences noteikšanu ir plaši izmantots paņēmiens bioķīmiskajā analīzē. Kā fluorescējošs atvasinājuma reaģents tas var uzlabot mērķa savienojuma fluorescences signālu, uzlabot noteikšanas jutību un selektivitāti. Šo tehnoloģiju plaši izmanto tādās jomās kā proteomika un zāļu metabolisms.
3. Olbaltumvielu sekvencēšana un struktūras pētījumi
Olbaltumvielu sekvencēšanā un strukturālajā izpētē to var izmantot, lai marķētu noteiktas pozīcijas vai atlikumus uz proteīniem, palīdzot pētniekiem noteikt proteīnu secību un struktūru. Šī marķēšanas metode palīdz izprast proteīnu funkcijas un mijiedarbību.
4. Proteolītisko enzīmu noteikšana
Var reaģēt ar proteolītisko enzīmu substrātiem, veidojot fluorescējošus produktus. Uzraugot šo produktu fluorescences intensitātes izmaiņas, var novērtēt proteolītisko enzīmu aktivitāti un kinētiskās īpašības. Tam ir liela nozīme enzīmu un skrīninga inhibitoru katalītiskā mehānisma izpētē.
1. Narkotiku skrīnings
Zāļu izstrādes procesā to var izmantot, lai pārbaudītu iespējamos zāļu mērķus. Saistoties un reaģējot ar mērķi, fluorescējošie amīni var atklāt mijiedarbības mehānismu starp zālēm un mērķiem, sniedzot svarīgu informāciju zāļu izstrādei un optimizācijai.
2. Zāļu metabolisma pētījumi
To var izmantot arī zāļu metabolisma pētījumos. Marķējot konkrētas funkcionālās grupas uz zālēm vai to metabolītiem, fluorescējošie amīni var palīdzēt pētniekiem izsekot vielmaiņas ceļiem un zāļu ātrumiem organismā. Tas ir ļoti svarīgi, lai novērtētu zāļu drošību un efektivitāti.
Citas lietojumprogrammas
1. Vides monitorings
Lai gan tā tiešais pielietojums vides monitoringā ir ierobežots, tā kā fluorescējoša atvasinājuma reaģenta īpašības nodrošina jaunu pieeju vides monitoringam. Kombinējot ar citām noteikšanas tehnoloģijām, iespējams ieņemt nozīmīgu lomu vides monitoringā, piemēram, atklāt piesārņotājus ūdenstilpēs.
2. Mācību un pētniecības rīki
Mācību un pētniecības jomā tas ir viens no neaizstājamiem instrumentiem. Demonstrējot fluorescējošo amīnu reakcijas procesu un rezultātus ar dažādiem savienojumiem, studenti un pētnieki var labāk izprast bioķīmijas un analītiskās ķīmijas pamatprincipus un metodes.
Sintēze parFluoreskamīnsamīni parasti ietver izejvielas, piemēram, benzoskābi, etilēndiamīnu, hloroformu vai citus šķīdinātājus, katalizatorus (piemēram, skābes vai bāzes). Dažos gadījumos var izmantot arī oksidētājus vai reducētājus, taču tie ir retāk sastopami tiešā fluorescējošo amīnu sintēzē.
Sintēzes soļi un ķīmiskie vienādojumi
Pirmkārt, benzoskābe var tikt pakļauta amidēšanas reakcijai ar etilēndiamīnu, lai iegūtu N-feniletilēndiamīda amīdu (šeit mēs pieņemam vienkāršotu starpproduktu, jo faktiskais starpprodukts var būt sarežģītāks). Šis solis parasti ir jāveic skābos vai sārmainos apstākļos, lai veicinātu reakciju starp karboksilgrupām un aminogrupām.
Ķīmiskais vienādojums (pieņemot, ka starpprodukts ir N-feniletilēndiamīda amīds):
benzoskābe + etilēndiamīns → N-feniletilēndiamīds + ūdens
Piezīme. Šis vienādojums ir shematisks attēlojums, un faktiskās reakcijās var rasties dažādi amīdu produkti, kam nepieciešami katalizatori (piemēram, skābes vai bāzes) un atbilstoši reakcijas apstākļi (piemēram, temperatūra un šķīdinātāji).
Nākamās darbības var ietvert ciklizācijas reakcijas, kas ietver amīda struktūras daļas pārvēršanu cikliskā struktūrā. Tomēr ciklizācijas reakcija, kas tieši pārvērš N-feniletilēndiamīdu par fluorescējošu amīnu, nepastāv, jo fluorescējošā amīna struktūra ir sarežģītāka, ieskaitot benzoksazolona struktūru. Tāpēc šajā posmā ir jāievieš citas funkcionālās grupas vai jāveic turpmākas strukturālas izmaiņas.
Pieņemtā ciklizācijas reakcija (tikai ilustrācijai, nevis faktiskais ceļš):
N-Feniletilēndiamīds → Vidēji ciklisks savienojums
Šeit “starpposma cikliskais savienojums” ir izdomāts starpprodukta ciklisks savienojums, kam nepieciešama turpmāka reakcija, lai to pārveidotu par fluorescējošu amīnu.
Lai cikliskos starpproduktus pārvērstu par fluorescējošiem amīniem, var būt nepieciešamas oksidēšanas, halogenēšanas, kondensācijas vai cita veida funkcionālo grupu pārveidošanas reakcijas. Šo reakciju konkrētie veidi un apstākļi ir atkarīgi no starpprodukta struktūras un mērķa produkta fluorescējošā amīna struktūras.
Fluorescējošo amīnu sarežģīto un daudzveidīgo sintēzes ceļu dēļ šeit nevar sniegt precīzu ķīmisko vienādojumu. Bet vispārīgi runājot, šīs reakcijas var ietvert oksidētāju (piemēram, ūdeņraža peroksīda, kālija permanganāta u.c.) izmantošanu skābekļa atomu ievadīšanai vai halogenējošu vielu (piemēram, hlora gāzes, nātrija bromīda u.c.) izmantošanu halogēna atomu ievadīšanai, kā arī turpmākas reakcijas, lai veidotu fluorescējošo amīnu raksturīgo struktūru.
Neatkarīgi no izmantotā sintēzes ceļa reakcijas maisījums galu galā ir jāattīra, lai iegūtu augstas -tīrības fluorescējošos amīnus. Attīrīšanas metodes var ietvert filtrēšanu, mazgāšanu, žāvēšanu, kristalizāciju, pārkristalizāciju, hromatogrāfisko atdalīšanu utt. Šo darbību mērķis ir noņemt piemaisījumus un nereaģējušās izejvielas, lai uzlabotu tīrības pakāpi un iznākumu.Fluoreskamīns.
Fluorescējošo amīnu noteikšanas princips aminogrupām ir uz ķīmiskām reakcijām balstīta fluorescējošās noteikšanas tehnoloģija, kas izmanto specifisku reakciju starp fluorescējošiem amīniem un aminogrupām (īpaši primārajām amīnu grupām), lai radītu produktus ar spēcīgu fluorescenci, tādējādi panākot jutīgu aminogrupu noteikšanu.
CNC apstrādes veidi
Fluorescējošo amīnu pamatīpašības
Fluorescējošais amīns ir organisks savienojums, kura molekulārajā struktūrā ir noteiktas funkcionālās grupas. Šīs funkcionālās grupas var ķīmiski mainīties, reaģējot ar aminogrupām, radot jaunas fluorescējošas vielas. Pašiem fluorescējošiem amīniem normālos apstākļos nav būtiskas fluorescences, taču, tiklīdz tie reaģē ar aminogrupām, to fluorescences īpašības būtiski mainās, ļaujot radītajiem produktiem izstarot spēcīgu fluorescenci noteikta viļņa garuma gaismas ierosmē.
dzirnavu CNC mašīna
Reakcijas mehānisms starp fluorescējošu amīnu un aminogrupu
Reakcija starp fluorescējošo amīnu un aminogrupu galvenokārt notiek starp fluorescējošā amīna karbonilgrupu (C=O) un aminogrupas slāpekļa atomu. Piemērotos reakcijas apstākļos (piemēram, noteikta pH vērtība, temperatūra utt.) fluorescējošā amīna karbonilgrupa tiks pakļauta kondensācijas reakcijai ar aminogrupu, veidojot Šifa bāzes struktūru. Šo reakcijas procesu parasti pavada ķīmisko saišu pārrāvums un veidošanās, kā arī izmaiņas elektroniskajā struktūrā, kā rezultātā būtiski mainās fluorescences īpašības.
Konkrēti, kad fluorescējošais amīns reaģē ar aminogrupu, fluorescējošā amīna molekulā esošais karbonilskābekļa atoms uzbrūk aminogrupas slāpekļa atomam, veidojot jaunu oglekļa slāpekļa dubultsaiti (C=N). Šī reakcija ne tikai maina fluorescējošo amīnu molekulu elektronisko struktūru, bet arī ļauj radītajiem produktiem izstarot spēcīgu fluorescenci ultravioletās vai redzamās gaismas ierosmē. Šī fluorescējošā signāla intensitāte un viļņa garums parasti ir saistīts ar reaģentu koncentrāciju, reakcijas apstākļiem un produkta struktūru.
FAQ
Kāda ir fluoreskamīna reakcija ar amīnu?
Fluoreskamīns ir definēts kā amīnu{0}}reaktīvā krāsviela, kasveido intensīvi fluorescējošus adduktus, reaģējot ar proteīna primārajiem amīniem, kas ļauj krāsot proteīnus pirms SDS caurules gēla elektroforēzes. Tam ir ierosmes maksimums pie aptuveni 390 nm un emisijas maksimums pie aptuveni 475 nm.
Kuras aminoskābes ir fluorescējošas?
Trīs dabiski fluorescējošās aminoskābes ir triptofāns (Trp), tirozīns (Tyr) un fenilalanīns (Phe). Lai gan visi trīs ir fluorescējoši, triptofāns ir visplašāk izmantotais bioloģiskajos lietojumos, jo tam ir visspēcīgākās fluorescences īpašības, lai gan tā viļņu garums ir ultravioletā diapazonā.
Kādas ķīmiskās vielas ir fluorescējošas?
Ksantēna atvasinājumi: fluoresceīns, rodamīns, Oregonas zaļais, eozīns un Teksasas sarkanais.
Cianīna atvasinājumi: cianīns, indokarbocianīns, oksakarbocianīns, tiakarbocianīns un merocianīns.
Skvarīna atvasinājumi un gredzena{0}}aizvietoti skvarīni, tostarp Seta un Square krāsvielas.
Skarīna rotaksāna atvasinājumi: sk. Tau krāsvielas.
Ko nosaka fluorescence?
Fluorometrija ir jebkura parametra mērīšanas metode, izmantojot fluorescējošu emisiju. Mūsdienu biozinātnes kontekstā noteikšanai izmanto fluorometrijubioloģiskās makromolekulas, piemēram, olbaltumvielasun izmēra to koncentrāciju eksperimentālajā paraugā.
Populāri tagi: fluorescamine cas 38183-12-9, piegādātāji, ražotāji, rūpnīca, vairumtirdzniecība, pirkt, cena, lielapjoma, pārdošana