Propidija jodīda pulveris, Tumši sarkana kristālija ar tīrību, kas ir lielāka vai vienāda ar 95% ar HPLC, šķīstot ūdenī, ir parasti lietots kodola fluorescējošais līdzeklis. Kā etiīdija bromīda analogs tas var iestrādāt starp bāzēm, lai panāktu saistīšanos ar DNS. Stabils istabas temperatūrā un spiedienā, tas ir mazs molekulas aromātisks savienojums. To var izmantot šūnu apoptozes noteikšanai, šūnu cikla analīzei un baktēriju aktivitātes izpētei. Bet vairumā gadījumu tā izmantošana ir ierobežota ar fiksētām vai infiltrētām šūnām. Ja ir sastopamas dzīvas šūnas, dzīvās šūnas tās aktīvi izskauž, tāpēc alkohola vai aldehīda reaģentus parasti izvēlas caurlaidības un fiksācijas procesiem. Aldehīdi un spirti bieži nav saderīgi ar fluorescējošiem proteīniem un noteiktiem virsmas marķieriem, tāpēc benzaldehīds var būt piemērotāka izvēle.
|
Ķīmiskā formula |
C27H34I2N4 |
|
Precīza masa |
668.09 |
|
Molekulmasa |
668.41 |
|
m/z |
668.09 (100.0%), 669.09 (29.2%), 670.09 (4.1%), 669.08 (1.5%) |
|
Elementārā analīze |
C, 48.52; H, 5.13; I, 37.97; N, 8.38 |
|
|
|
Uzglabāšana un šķīdība
|
uzglabāšana |
|
|
|
Informācija par šķīdību |
H2O: 5 mg/ml (7,48 mm), ieteicams sonikācija un apkure līdz 60 grādiem. DMSO: 6,68 mg/ml (10 mm), ieteicams sonikācija. |
1. Šūnu apoptozes un nekrozes noteikšana
(1) Tas var brīvi iekļūt mirušās vai bojātās šūnu membrānās, saistīties ar DNS un izstarot sarkano fluorescenci, ko izmanto, lai identificētu un kvantitatīvi noteiktu mirušās un nekrotiskās šūnas.
(2) Plūsmas citometrijā to parasti izmanto, lai atšķirtu dzīvās šūnas, apoptotiskās šūnas un nekrotiskās šūnas.
2.Cell cikla analīze
(1) Pēc cieši saistīšanās ar DNS tā fluorescences intensitāte ir proporcionāla DNS saturam.
(2) Izmērot DNS saturu šūnās, izmantojot plūsmas citometriju, var veikt šūnu cikla analīzi, ieskaitot atšķirību starp G0/G1 fāzi, S fāzi un G2/M fāzi.
3.Cell kodola krāsošana
(1) Parasti izmanto šūnu kodolu fluorescences krāsošanai, īpaši histoloģiskos, citoloģiskos un patoloģiskos pētījumos.
(2) To var izmantot, lai novērotu šūnu kodolu morfoloģiju, lielumu un daudzumu.
4. Baktēriju aktivitātes izpēte
(1) To dažreiz izmanto baktēriju aktivitātes izpētē, bet uzmanība jāpievērš ārpusšūnu nukleīnskābju (ENA) traucējumiem.
(2) Dažos gadījumos to var izmantot arī kombinācijā ar citām krāsvielām, lai precīzāk novērtētu baktēriju aktivitāti.
5.Cell membrānas integritātes indikācija plūsmas citometrijā
(1) Tas nevar iekļūt normālās dzīvās šūnās, bet var iekļūt mirušās vai bojātās šūnu membrānās.
(2) Tāpēc plūsmas citometrijā to bieži izmanto kā šūnu membrānas integritātes indikatoru.
6. Citas lietojumprogrammas
(1) To var izmantot arī kodola krāsošanai tādos pētījumos kā in situ hibridizācija un imūnhistoķīmija.
(2) Dažos gadījumos to var izmantot arī, lai noteiktu šūnu membrānas caurlaidības izmaiņas.
Citi izmantojumiPropidija jodīda pulverisŠūnu eksperimentos ietilpst:
Šūnu dzīvotspējas pārbaude:
To parasti izmanto šūnu dzīvotspējas noteikšanai, jo tā nevar iekļūt dzīvu šūnu šūnu membrānā, bet var iekļūt bojāto vai mirušo šūnu šūnu membrānā, saistīties ar šūnu nukleīnskābēm un izstarot sarkano fluorescenci, lai atšķirtu dzīvās un mirušās šūnas.
01
Drošība:
Salīdzinot ar dažām citām fluorescējošām krāsvielām, piemēram, EB (etiidija bromīds), tas ir salīdzinoši drošāks, jo EB ir zināms spēcīgs kancerogēns mutagēns
02
Šūnu apoptozes pētījumi:
Bieži izmanto kombinācijā ar citām krāsvielām, piemēram, aneksīnu V, lai noteiktu dažādus šūnu apoptozes posmus. Anneksīns V kombinēts ar FITC var marķēt agrīnas apoptotiskās šūnas, savukārt tas var marķēt vēlīnās apoptotiskās un nekrotiskās šūnas.
03
DNS sadrumstalotības noteikšana:
Šūnu apoptozes vēlīnā stadijā to var izmantot, lai noteiktu DNS sadrumstalotību, kas ir raksturīga šūnu apoptozes maiņa.
04
TUNEL metode:
To var izmantot TUNEL (terminālajā deoksinukleotidilpārdevumā, kas mediētais DUTP Nick End marķēšanas) eksperimenti, lai noteiktu DNS virkņu pārtraukumus šūnu apoptozes laikā.
05
Šūnu cikla analīze:
Var izmantot šūnu cikla analīzei plūsmas citometrijā, identificējot dažādus šūnu cikla posmus, izmērot DNS satura izmaiņas.
06
Hromosomu un DNS marķieri:
Izmanto hromosomu vai DNS marķēšanai, tādu procesu novērošanai un analīzei kā DNS replikācija, transkripcija un atjaunošana.
07
Organelle marķēšana:
To var izmantot, lai marķētu un vizualizētu organellas, piemēram, mitohondrijas un lizosomas šūnās ar īpašiem viļņu garumiem.
08
Neirozinātnes lietojumprogrammas:
Tas tiek izmantots neirozinātnē, lai marķētu neironus un sinapses, ievērot neironu signālu pārnešanu utt.
09
Gēnu ekspresijas analīze
Tas var kvantitatīvi analizēt gēnu ekspresijas līmeni un to sadalījumu šūnās, marķējot gēnu ekspresijas produktus.
10
1.Cell membrānas iespiešanās:
Propidija jodīda pulverisNevar iekļūt neskartajā šūnu membrānā, bet var nokrāsot šūnas kodolu caur mirušo šūnu šūnu membrānu un vēlu stadijas apoptotiskām šūnām. Šī īpašība padara to par ideālu krāsu, lai atšķirtu dzīvās un mirušās šūnas.
2.fluorescences intensitātes uzlabošana:
Pēc saistīšanās ar nukleīnskābi fluorescences intensitāti var palielināt par 20-30 reizes, un maksimālais ierosmes viļņa garums pāriet uz sarkano joslu par apmēram 30–40 nm, savukārt maksimālā emisijas viļņa garums pāriet uz zilo joslu par apmēram 15 nm, tas padara to ļoti jutīgu.
3.Spektrālās īpašības:
Tā maksimālais ierosmes/emisijas viļņa garums kļūst par 535/617 nm, kas padara to labu diskrimināciju vairāku - krāsu fluorescences analīzē, it īpaši, ja to izmanto kopā ar citām dienasgaismas krāsvielām.
4. saistīšana ar DNS un RNS:
Tas var saistīties ar RNS un nepieciešama nukleāzes apstrāde, lai atšķirtu DNS no RNS krāsošanas
Tas nodrošina ērtības RNS izpētei.
5..crabierīce:
Mēs piedāvājam dažādas transmisijas sastāvdaļas, ieskaitot ķēdes ratus, veltņu ķēdes, pārnesumus, savienojumus, plauktus, rumbas, skriemeļus, konusveida piedurknes, gultņu sēdekļus un daudz ko citu.
6. drošība:
Salīdzinot ar dažām citām fluorescējošām krāsvielām, piemēram, EB (Ethidium Bromide), tā ir salīdzinoši drošāka, jo EB ir zināma spēcīga kancerogēna mutagēna.
7.
Piemērots dažādām eksperimentālām metodēm, piemēram, fluorescences mikroskopijai, konfokālā mikroskopijai, plūsmas citometrijai un fluorescences analizatora analīzei.
8. Videi draudzīgs:
Tās atkritumus var tieši apstrādāt, neradot piesārņojumu videi, kas atbilst mūsdienu zinātnisko pētījumu prasībām vides aizsardzībai.
nelabvēlīga reakcija
Propidija jodīda pulveris(PI) ir fluorescējoša krāsviela, ko plaši izmanto šūnu bioloģijas izpētē. Tās pamatfunkcija ir marķēt mirušās vai bojātās šūnas, iestrādājot sarkano fluorescenci (ierosmes viļņa garums 535 nm, emisijas viļņa garums 617 nm) starp dubultā iesprostotās DNS bāzes pāriem. Sakarā ar nespēju iekļūt dzīvu šūnu membrānās, PI ir kļuvis par klasisku instrumentu, lai atšķirtu dzīvās un mirušās šūnas, un to plaši izmanto tādos laukos kā plūsmas citometrija, fluorescences mikroskopija un apoptozes noteikšana. Tomēr kā ķīmisks reaģents, PI pulveris var radīt risku cilvēku veselībai un videi, ja to lieto nepareizi vai nepietiekami aizsargāts.
Nevēlamās reakcijas, kas saistītas ar kontaktu ar ādu
Tiešs kontakts starp Pi pulveri vai tā šķīdumu un ādu var izraisīt kairinošas reakcijas, kas izpaužas kā apsārtums, nieze, dedzinoša sajūta vai sāpes uz ādas. Šo reakciju parasti izraisa tieša kairinošā PI ietekme uz ādas slāņa radzeni. Ilgtermiņa vai atkārtota iedarbība var pasliktināt ādas bojājumus, izraisot pastiprinātas vietējās iekaisuma reakcijas un pat izraisot kontakta dermatītu. Tāpēc, apstrādājot pi pulveri vai šķīdumu, ķīmiski izturīgi cimdi (piemēram, nitrila gumijas cimdi) jāvalkā, lai izvairītos no tiešas saskares ar ādu. Ja nejauši saskaras ar ādu, nekavējoties izskalojiet kontakta zonu ar daudz ūdens un uzklājiet vieglu ādas kopšanas krēmu, lai mazinātu kairinājumu.
Nevēlamās reakcijas, kas saistītas ar acu kontaktu
PI ir nozīmīgāka kairinoša ietekme uz acīm un var izraisīt acu slimības, piemēram, konjunktivītu un keratītu. Simptomi ir apsārtums, pietūkums, sāpes, asarošana, fotofobija, izplūdusi redze utt. Smagos gadījumos PI var sabojāt radzenes epitēlija šūnas, izraisot radzenes čūlas vai rētu veidošanos, kas savukārt var ietekmēt redzi. Darbojoties ar Pi pulveri vai šķīdumu, jāvelk aizsargbrilles vai sejas vairogi, lai novērstu pulvera vai šķīduma izšļakstīšanos acīs. Ja nejauši saskaras ar acīm, vismaz 15 minūtes nekavējoties noskalojiet ar daudz ūdens vai fizioloģiskā šķīduma un pēc iespējas ātrāk meklējiet medicīnisko palīdzību.
Ar inhalāciju saistītās nevēlamās reakcijas
Pēc pi pulvera vai aerosola daļiņu ieelpošanas tas var izraisīt kairinājumu elpošanas sistēmai, izraisot tādus simptomus kā klepus, kakla iekaisis, elpas trūkums un necaurlaidība krūtīs. Ilgtermiņa vai atkārtota ieelpošana var palielināt elpošanas iekaisuma risku, un pat ilgstoši {- termins ietekmē plaušu funkciju. Darbojoties ar Pi pulveri, tas jāveic labi ventilējamā vidē, piemēram, izmantojot tvaika nosūcēju vai vietējo izplūdes sistēmu. Valkājiet putekļu masku vai respiratoru, lai novērstu pulvera vai aerosola daļiņu ieelpošanu. Regulāri veiciet plaušu funkcijas testus, īpaši darbiniekiem, kuri ilgu laiku ir pakļauti PI.
Nevēlamās reakcijas, kas saistītas ar nejaušu norīšanu
Lai arī PI galvenokārt izmanto eksperimentos in vitro, nejauša norīšana joprojām var notikt, īpaši bērniem vai eksperimentāliem dzīvniekiem. PI var stimulēt ietekmi uz kuņģa -zarnu trakta gļotādu, izraisot tādus simptomus kā slikta dūša, vemšana, sāpes vēderā un caureja. Smagos gadījumos pārmērīgas uzņemšanas dēļ var rasties ķīmisks gastrīts vai enterīts. Uzglabājiet pi pulveri vai šķīdumu bez bērniem, lai izvairītos no uzņemšanas. Eksperimentālie dzīvnieki ir stingri jāuzrauga, ja tie ir pakļauti PI, lai novērstu nejaušu norīšanu. Ja nejauši norij, nekavējoties meklējiet medicīnisko palīdzību un saņemiet mērķtiecīgu ārstēšanu, pamatojoties uz simptomiem.
Populāri tagi: Propidium jodīds pulveris CAS 25535-16-4, piegādātāji, ražotāji, rūpnīca, vairumtirdzniecība, pirkšana, cena, lielapjoma pārdošana