Tiazolilzils CAS 298-93-1

Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd. ir viens no pieredzējušākajiem tiazolilzilā cas 298-93-1 ražotājiem un piegādātājiem Ķīnā. Laipni lūdzam vairumtirdzniecībā augstas kvalitātes tiazolilzilā cas 298-93-1 pārdošanai šeit no mūsu rūpnīcas. Ir pieejams labs serviss un saprātīga cena.

Tiazolilzils, kas labāk pazīstams kā MTT (3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolija bromīds), piemīt aizraujoša dualitāte — tas ir gan būtisks līdzeklis šūnu bioloģijā, gan hameleoniska ķīmiskā dīvainība. Šis dzeltenais kristāliskais pulveris piedzīvo pārsteidzošu metamorfozi dzīvās šūnās: mitohondriju reduktāzes sašķeļ tā tetrazolija gredzenu, pārvēršot to nešķīstošā purpursarkanā formazāna nogulsnēs – reakcija ir tik vizuāli pārsteidzoša, ka kļuvusi par zelta standartu šūnu dzīvotspējas mērīšanai. Tomēr ārpus laboratorijas stenda MTT atklāj vairāk ezotēriskas uzvedības; tā kristāliskā struktūra veido savdabīgus "siļķu kauliņu" modeļus mikroskopijā, savukārt tā redoksīpašības ļauj tai piedalīties eksotiskās fotoķīmiskās reakcijās, ja tiek pakļauta noteikta viļņa garuma gaismas iedarbībai. Interesanti, ka savienojumam ir reta parādība, ko sauc par "metahromāziju" — dažādas krāsas atkarībā no koncentrācijas un molekulārās vides — šo īpašību savulaik izmantoja tekstilķīmiķi, lai radītu "gudras" krāsvielas. Nesenie pētījumi ir atklājuši tā negaidīto lomu kā vāju noteiktu elpošanas ķēdes enzīmu inhibitoru, norādot, ka šis visuresošais testa reaģents, iespējams, ir smalki ietekmējis vielmaiņas procesus, kurus zinātnieki to izmanto, lai pētītu. Izšķīdinot organiskajos šķīdinātājos, MTT šķīdumiem ir neparasts fluorescences slāpēšanas efekts, kas ir mulsina fizikālos ķīmiķus, liekot domāt par sarežģītu starpmolekulāru mijiedarbību, kas joprojām gaida pilnīgu skaidrojumu.

Tiazolilzils,Ķīmiskais nosaukums ir 3-(4,5-dimetil-2-tiazola)-2,5-difeniltetrazolija bromīds, saīsināts kā MTT, kas ir svarīgs organisks savienojums. Kopš 1983. gadā Mosmans pirmo reizi ziņoja par MTT krāsošanas izmantošanu, lai noteiktu šūnu augšanu un izdzīvošanu, MTT ir plaši izmantots tādās jomās kā dzīvības zinātnes, medicīnas pētījumi un zāļu izstrāde. Tālāk ir sniegts detalizēts tā mērķa skaidrojums:

Pielietojums šūnu bioloģijas pētījumos

 

MTT ir viena no klasiskajām šūnu proliferācijas noteikšanas metodēm. Šūnu kultivēšanas laikā dehidrogenāzes, piemēram, sukcināta dehidrogenāze dzīvu šūnu mitohondrijās, var reducēt eksogēno MTT līdz nešķīstošam zili violetam kristāliskam formazānam, kas nogulsnējas šūnā. Atmirušajām šūnām trūkst šīs reducējošās spējas, un tāpēc tās neražo formazānu. Izšķīdinot formazānu šūnās un izmērot tā gaismas absorbcijas vērtību noteiktos viļņu garumos (piemēram, 490 nm vai 562 nm), izmantojot ar enzīmu saistīto imūnsorbcijas testu (ELISA) lasītāju, dzīvu šūnu skaitu var netieši atspoguļot. Noteiktā šūnu skaita diapazonā izveidoto MTT kristālu daudzums ir proporcionāls šūnu skaitam, tāpēc šūnu proliferāciju var noteikt, pamatojoties uz izmērīto absorbcijas vērtību (OD vērtību).

Pielietojums šūnu bioloģijas pētījumos

 

MTT var izmantot arī, lai noteiktu zāļu vai citu ārstēšanas metožu (piemēram, starojuma apstarošanas) toksicitāti uz kultivētām šūnām in vitro. Salīdzinot ārstēšanas grupas un kontroles grupas OD vērtības, var novērtēt zāļu vai ārstēšanas metožu ietekmi uz šūnu aktivitāti. Jo lielāka OD vērtība, jo spēcīgāka ir šūnu aktivitāte; Gluži pretēji, tas norāda, ka jo vājāka ir šūnu aktivitāte vai lielāka šūnu toksicitāte. Šo metodi plaši izmanto zāļu skrīningā, toksikoloģijas pētījumos un citās jomās. Lai gan MTT galvenokārt izmanto šūnu proliferācijas un citotoksicitātes mērīšanai, dažos gadījumos to var izmantot arī, lai palīdzētu pētīt šūnu apoptozi. Šūnu apoptozes procesā mainās enzīmu aktivitāte šūnā, kas var ietekmēt MTT reducējošo spēju. Salīdzinot OD vērtību atšķirību starp apoptotiskām šūnām un normālām šūnām, var provizoriski noteikt šūnu apoptozes rašanos. Tomēr jāatzīmē, ka MTT nav specializēta metode šūnu apoptozes noteikšanai, un tās rezultāti ir vispusīgi jāanalizē kopā ar citām apoptozes noteikšanas metodēm.

Pielietojums zāļu izstrādē

 

Zāļu izstrādes procesā MTT tests ir plaši izmantota lielas{0}}caurlaidības zāļu skrīninga metode. Kopā inkubējot testa zāles ar šūnām un izmantojot MTT testu, lai noteiktu izmaiņas šūnu aktivitātē, potenciālās aktīvās zāļu molekulas var ātri pārbaudīt. Šīs metodes priekšrocības ir vienkārša darbība, uzticami rezultāti un liela caurlaidspēja, un tai ir svarīga pielietojuma vērtība zāļu izstrādes sākumposmā. MTT testu var izmantot arī, lai pētītu zāļu darbības mehānismu. Salīdzinot šūnu aktivitātes izmaiņas dažādos zāļu ārstēšanas apstākļos, var provizoriski noteikt zāļu ietekmi uz tādiem procesiem kā šūnu proliferācija un apoptoze. Apvienojot citas molekulārās bioloģijas metodes, piemēram, Western blot un plūsmas citometriju, var vēl vairāk atklāt zāļu mērķus un signalizācijas ceļus. Zāļu drošības novērtējumā MTT testu var izmantot, lai novērtētu zāļu toksisko ietekmi uz šūnām. Mērot šūnu OD vērtības izmaiņas pēc ārstēšanas ar zālēm, var noteikt, vai medikamentam ir citotoksicitāte un toksicitātes stiprums. Tas ir ļoti svarīgi, lai vadītu preklīniskos pētījumus un zāļu klīnisko pielietojumu.

MTT pielietojums citās jomās

 

Imunoloģiskajos pētījumos MTT testu var izmantot, lai noteiktu limfocītu proliferācijas spēju. Kopā inkubējot limfocītus ar antigēniem vai imūnstimulatoriem un mērot izmaiņas šūnu aktivitātē, izmantojot MTT testu, var novērtēt limfocītu imūnās atbildes spēju. Šo metodi plaši izmanto vakcīnu izstrādē, imūnterapijā un citās jomās. Onkoloģijas pētījumos MTT testu var izmantot, lai noteiktu audzēja šūnu proliferācijas aktivitāti un zāļu jutību. Salīdzinot audzēja šūnu OD vērtību izmaiņas dažādos zāļu ārstēšanas apstākļos, var pārbaudīt zāļu molekulas ar inhibējošu iedarbību uz audzēja šūnām un novērtēt to pretvēža iedarbību. Tam ir liela nozīme audzēju klīniskās ārstēšanas vadīšanā. Vides toksikoloģijas pētījumos MTT testu var izmantot, lai novērtētu vides piesārņotāju toksisko ietekmi uz šūnām. Kopā inkubējot šūnas ar dažādu piesārņotāju koncentrāciju un mērot izmaiņas šūnu aktivitātē, izmantojot MTT testu, var noteikt piesārņojošo vielu toksicitāti un darbības mehānismu. Tam ir liela nozīme vides piesārņojošo vielu ekoloģisko risku novērtēšanā un vides aizsardzības politikas veidošanā. 

Eksperimentālie soļitiazolilzilsmetode:

1: tripsīns sagremo logaritmiskās fāzes šūnas, centrifugē un pēc izbeigšanas savāc tās, lai izveidotu šūnu suspensiju, un pielāgo tā koncentrāciju uz 5-10 pēc šūnu skaita × 104/ml. Iesācējiem ir nepieciešams panākt, lai šūnas sasniegtu 5-10 × 104/ml, bieži vien nezina, kur sākt. Es esmu šeit, lai sniegtu jums vienkāršu metodi, kā sākotnēji noteikt šūnu skaitu.

Kā piemēru ņemiet 25 cm2, ko parasti izmanto šūnu kultūrai:

1) Šūnu blīvums ir aptuveni 80% ~ 90% (tālāk redzamais attēls parāda aptuveno šūnu stāvokli pie 80% ~ 90% blīvuma). Pēc sagremošanas un centrifugēšanas noņemiet supernatantu un pievienojiet 3 ml barotnes, lai to sajauktu.

2) Paņemiet jaunu 15 ml sterilu centrifūgas mēģeni (nākamajam 96 bedrīšu plāksnes inokulācijas posmam) un piepildiet to ar aptuveni 9 ml barotnes.

3) Paņemiet 1 ml no 3 ml šūnu suspensijas, kas sagatavota pirmajā solī, pievienojiet to augšējā mēģenē un pēc sajaukšanas saskaitiet šūnas. Šobrīd tas parasti ir 5–10 vai mazāk × 104/ml, kas ir līdzvērtīgs 5–10 šūnām uz vienu šūnu 4 šūnu skaitīšanas paneļa šūnās (skatīt attēlu zemāk); Ja koncentrācija nav pietiekama, šūnu suspensiju pievieno atbilstoši skaitīšanas rezultātam un katru pilienu aprēķina kā 50 ul.

4) Šūnu skaits ir jāpielāgo atbilstoši dažādiem eksperimenta mērķiem. Piemēram, vispārējā šūnu proliferācijas eksperimentā var izmantot 2000 šūnas vienā iedobē (ekvivalents šūnu suspensijas blīvumam 2 × 104/ml), 5000 līdz 10 000 šūnu vienā iedobē (ekvivalents šūnu suspensijas blīvumam 5 × 104/ml). Turklāt šūnu skaits ir jānosaka arī atbilstoši to īpašībām, piemēram, augšanas ātrumam. Piemēram, ātrāk augošo šūnu blīvums var būt nedaudz mazāks.

2. Pēc šūnu suspensijas pagatavošanas to viegli samaisiet un katrā caurumā pievienojiet 100 ul, lai pārbaudāmo šūnu blīvums būtu 5000-10000/caurumā (malas caurums ir piepildīts ar sterilu PBS).

L Piezīme. Tā kā šūnas turpinās nosēsties pēc sajaukšanas, inokulācijas procesā ir nepieciešams atkārtoti sajaukt, piemēram, sajaucot reizi sešos caurumos, lai nodrošinātu, ka inokulācijas šūnu blīvums starp caurumiem ir tieši tāds pats, kas ir ļoti svarīgi MTT rezultātiem.

3. Ievietojiet inokulēto šūnu kultūras plati inkubatorā kultivēšanai, līdz šūnu vienslānis ir pārklāts ar cauruma dibenu (96 bedrīšu plakana plāksne), un pievienojiet zāles ar koncentrācijas gradientu. Principā zāles var pievienot pēc tam, kad šūna ir piestiprināta pie sienas, vai divas stundas, vai pusi dienas, bet mēs bieži pievienojam zāles iepriekšējās dienas pēcpusdienā un nākamajā rītā. Parasti tiek iestatīti 5-7 gradienti, 100 ul uz vienu caurumu un 3-5 vairāki caurumi. Ieteicams iestatīt 6, pretējā gadījumā ir grūti atspoguļot reālo situāciju. Šo attēlu var izmantot kā atsauces soli 96 caurumu plāksnei.

L Dozēšanai daži cilvēki tieši pievieno zāles 96 iedobju plāksnēs dažādos tilpumos, veidojot koncentrācijas gradientu. Bet es domāju, ka EP mēģenē jāmēģina sajaukt dažādas koncentrācijas zāles, pēc tam no 96 bedrīšu plāksnes jānoņem kultūras supernatants (ko var izsūkt ar izlādes pistoli) un jāpievieno 100 ul barotnes, kas satur dažādas zāļu koncentrācijas, kas var nodrošināt zāļu koncentrācijas precizitāti. Turklāt jāņem vērā, ka, ja tiek izmantota šī metode, pirms zāļu pievienošanas nesūciet visu 96 iedobju plāksnes kultūras šķīdumu. Jums jāpievieno paraugi tūlīt pēc tam, kad daļa no tā izsūknēta, lai izvairītos no šūnu nāves 96 iedobju plāksnes izžūšanas dēļ.

Inkubējiet ar 4,5% CO2 37 grādu temperatūrā 16-48 stundas un novērojiet zāļu iedarbību apgrieztā mikroskopā. Nākamajā attēlā parādīts tipisks zāļu citotoksicitātes gradients.

4. Katrai iedobei pievienojiet 10 ul MTT šķīduma (5 mg/ml, ti, . 0.5% MTT) un turpiniet kultivēt 4 stundas. Ja zāles var reaģēt artiazolilzilskultūras šķīdumu pēc centrifugēšanas var izmest, un kultūras šķīdumu, kas satur MTT, var pievienot pēc mazgāšanas ar PBS 2-3 reizes.

5. Apturiet kultūru un sagatavojiet šķīdināšanai un kristalizācijai.

Tiazolilzils, kura ķīniešu nosaukums ir Methyl Blue, ir svarīgs organisks savienojums, ko plaši izmanto medicīnā, bioloģijā un ķīmijā. medicīnā to bieži izmanto, lai ārstētu saindēšanos ar nitrītiem, saindēšanos ar cianīdu utt., kā arī tiek izmantota dažu slimību diagnostikā un adjuvantā ārstēšanā; Bioloģiskajos pētījumos to var izmantot kā krāsošanas līdzekli šūnu vai audu marķēšanai. Tomēr, tāpat kā daudzām zālēm, metilēnzilajam lietošanas laikā var būt arī vairākas blakusparādības:

Gremošanas sistēmas blakusparādības

Slikta dūša un vemšana ir viena no biežākajām metilēnzilā blakusparādībām gremošanas sistēmā. Kad metilēnzils nonāk organismā, tas var stimulēt kuņģa-zarnu trakta gļotādu, izraisot sliktu dūšu un pat vemšanu smagos gadījumos. Šis simptoms ir izteiktāks, ja intravenozās injekcijas ātrums ir pārāk ātrs vai deva ir pārāk liela. Piemēram, dažos klīniskos gadījumos pacientiem var rasties ievērojama slikta dūša un vemšana neilgi pēc ātras intravenozas metilēnzilā injekcijas, kas ietekmē viņu komfortu un ārstēšanas pieredzi. Dažiem pacientiem pēc metilēnzilā lietošanas var rasties sāpes vēderā, un sāpju pakāpe var atšķirties atkarībā no individuālajām atšķirībām, sākot no viegla diskomforta līdz smagākām sāpēm.

Tajā pašā laikā to var pavadīt arī caureja, kas var būt saistīta ar metilēnzilā traucētu zarnu peristaltiku un gremošanas funkciju, izraisot patoloģiskas zarnu kustības un izmaiņas gremošanas šķidruma sekrēcijā. Ilgstoša vai bieža vēdera sāpju un caurejas parādīšanās ne tikai ietekmē pacienta un fizisko veselību, var izraisīt arī citas barības vielu uzsūkšanās, absorbcijas.

Urīnceļu sistēmas blakusparādības

Pēc metilēnzilā lietošanas urīna krāsa kļūs zila, ko izraisa metilēnzilā un tā metabolītu izdalīšanās urīnā caur nierēm. Kopumā šīs urīna krāsas izmaiņas ir īslaicīgas un neradīs nopietnu ietekmi uz fizisko veselību. Bet atsevišķos īpašos gadījumos, piemēram, pacientiem ar urīnceļu sistēmas slimībām, urīna krāsas izmaiņas var traucēt slimības diagnozi, un ārstiem ir jāveic visaptveroša analīze, pamatojoties uz citiem izmeklēšanas rādītājiem. Urinēšanas laikā daži pacienti var sajust durstošu sajūtu urīnizvadkanāla atverē.

 

Tas var būt saistīts ar metilēnzilā stimulējošo iedarbību uz urīnizvadkanāla gļotādu, īpaši, ja urīna koncentrācija ir augsta vai urīnizvadkanāla gļotāda tiek berzēta urinēšanas laikā, durstīšanas sajūta būs izteiktāka. Šis simptoms var radīt zināmu diskomfortu pacientiem un ietekmēt viņu ikdienas dzīvi.

Neiroloģiskas blakusparādības

Reibonis un galvassāpes ir metilēnzilā bieži sastopamas neiroloģiskas blakusparādības. Pēc metilēnzilā lietošanas pacientiem var rasties reibonis un dezorientācija galvā, vai arī rodas diskomforts, piemēram, pietūkums un sāpes galvā. Šis simptoms var ietekmēt pacienta uzmanību un domāšanas spēju, kā arī samazināt darba un dzīves efektivitāti. Reiboņa un galvassāpju rašanās var būt saistīta ar metilēnzilā ietekmi uz smadzeņu asinsvadiem un nerviem, un konkrētajam mehānismam vēl ir nepieciešama turpmāka izpēte. Retos gadījumos metilēnzils var izraisīt apziņas traucējumus, piemēram, miegainību, komu utt.

Tas parasti ir saistīts ar pārmērīgu metilēnzilā lietošanu vai pacientiem, kuri ir pārāk jutīgi pret šīm zālēm, izraisot nopietnu centrālās nervu sistēmas inhibīciju. Apziņas traucējumi ir nopietna blakusparādība, kas var apdraudēt pacienta dzīvības drošību un prasa tūlītēju glābšanas ārstēšanu.

1.Kāda ir tiazolilzilā tetrazolija bromīda izmantošana?

Tiazolyl Blue Tetrazolium Blue (MTT) var izmantot šūnu proliferācijas mērīšanai. MTT ražo dzeltenīgu šķīdumu, kas dzīvo šūnu mitohondriju dehidrogenāzes ietekmē tiek pārveidots par tumši zilu, ūdenī nešķīstošu -MTT formazānu.

2. Vai tiazolilzilu ir droši uzglabāt?

Temperatūras apstākļi: noslēdziet pulveri un uzglabājiet to ledusskapī -20 grādos, lai saglabātu sasaldēšanu, kas var efektīvi pagarināt glabāšanas laiku (parasti 1–2 gadi); īslaicīgai uzglabāšanai (1 mēneša laikā) var īslaicīgi turēt 4 grādu aukstuma apstākļos.

Gaismas- un mitruma-izturības{1}}prasības: MTT pulveris ir gaismas-jutīgs, un tas jāuzglabā brūnās reaģentu pudelēs vai caurspīdīgās pudelēs, kas ietītas ar skārda foliju. Tikmēr jāpievieno žāvēšanas līdzekļi (piemēram, silikagels), lai pulveris neuzsūktu mitrumu un nesaliptu.

3.Vai mainīsies tiazolilzilā krāsa?

Ja šķīdumā parādās zili purpursarkanas nogulsnes vai tas kļūst tumšāks, tas norāda, ka tas ir oksidējies un to nevar turpināt lietot.
Nenovietojiet šķīdumu istabas temperatūrā vai gaišā vidē, jo tas var ātri sabojāt.

Populāri tagi: tiazolilzils cas 298-93-1, piegādātāji, ražotāji, rūpnīca, vairumtirdzniecība, pirkt, cena, vairumā, pārdošanai